1. 准备所需的培养基、离心管以及无菌枪头等;(培养基提前预热)2. 将所有细胞悬液转移至离心管中;3. 900-1000rpm,3min离心;4. 弃上清,加5mL PBS轻轻重悬细胞进行润洗,再900-1000rpm,3min离心;Tips:此处PBS润洗是为了去除细胞碎片,平时培养若细胞碎片不多可以忽略此步骤,若碎片偏多,可以重复...
基础Eagle培养基(Basal Medium Eagle),1955年Eagle设计,BSS+12种氨基酸+谷氨酰胺+8种维生素。简单、便于添加,适于各种传代细胞系和特殊研究用,在此基础上改良的细胞培养基品种有MEM、DMEM、IMDM等。1、BME细胞培养基经典的培养基有很多种,其中 DMEM、 RPMI 1640、 MEM 、 DMEM/F12 都是应用最广泛的培养基。其他...
1. 补液法:培养基变黄时可补加适量(1~2mL)新鲜培养基,补加1-2次之后,用离心的方式全部换液,离心1200rpm (约250g)3分钟。2. 半换液法:以T25瓶子为例,瓶子里装有5mL培养基。竖起瓶子静置一段时间,待细胞沉底(以肉眼观察到沉底为限),小心吸出2.5mL的培养基,转移到离心管,离心1200rpm (约...
THP-1细胞的培养体系通常使用RPMI-1640作为基础培养基,并添加10%的胎牛血清(FBS)和1%的双抗(青霉素/链霉素,P/S)以提供必要的营养和防止污染。此外,一些实验室还会在培养基中加入0.05mM的β-巯基乙醇(β-mercaptoethanol),这是一种常用的培养补充剂,具有抗氧化的作用,可减少氧化应激对THP-1细胞的影响。
一、THP-1细胞的培养方法 1、细胞复苏 准备工作:15/50mL的离心管,马克笔,培养瓶(T25)/培养皿(直径60mm),RPMI 1640培养基,胎牛血清(FBS),双抗(PS),酒精瓶(消毒杀菌)+酒精棉球,离心管/试剂管架子,移液枪,tip头(1000/200ul)。 (1)首先用酒精棉球擦拭细胞房的实验台子,将我们所需要上述物品放入台子里,并...
THP-1细胞被发现自发贴壁[3],可以轻吹收集细胞或者丢弃贴壁部分细胞;2.当贴壁细胞比例高于20%,建议排查细胞生长培养箱温度及CO2浓度、培养基成分(营养体系的酸碱性)、以及培养瓶可用非TC处理过的培养瓶,不利于细胞贴壁;3.更换血清可能会导致THP-1细胞很容易分化成为巨噬细胞。
THP-1细胞的特点 1.喜欢酸性环境 在偏酸性环境中,THP-1生长更快,所以当培养基稍微变黄(呈橘红色)时,是适合细胞生长的,此时补液或半换液即可。(详细操作见下文换液篇) 2.有密度依赖性 THP-1细胞密度低时,生长较慢,培养密度维持在50万-100万细胞/毫升为宜;超过200万/毫升则需要传代。
一、培养基选择: THP-1细胞可以在含有10%胎牛血清(FBS)的RPMI-1640培养基中维持生长。此外,可以添加适量的抗生素(如青霉素和链霉素)来防止细菌污染。 二、细胞传代: 当THP-1细胞达到80%~90%的密度时,需要进行细胞传代。首先,将细胞培养液离心,以去除细胞沉淀。然后,用无菌PBS洗涤细胞,以去除残留的培养基。接下...
类型 细胞系完全培养基 THP-1细胞完全培养基由尚恩生物技术团队精心优化,经过长期测试,本产品可保持THP-1细胞最佳的生长状态。本产品中已包含THP-1细胞生长所需的各种成分,无需添加任何成分,可直接用于THP-1细胞的体外培养。本产品仅供进一步科研使用,不得用于诊断、治疗、临床、家庭及其它用途。 经本公司配方优化...
THP-1复苏后恢复较慢,如无特殊情况,复苏后48小时内不对细胞进行操作; THP-1生长需要稳定的环境,不频繁拿出培养箱,不频繁离心; 培养时瓶子竖立放置(瓶盖朝上),可增加细胞局部密度,促进细胞增殖。 β-巯基乙醇可以消除活性氧自由基,维持细胞高密度生长。若培养基中不添加β-巯基乙醇,长期培养细胞可能会出现大量贴壁...