用PMA孵育THP-1细胞48h,显示THP-1(40X)在(A)诱导前(B)诱导后的形态学变化。它们的形态由圆形变为细长和扁平。巨噬细胞进一步诱导成M1型实验步骤:(1)诱导培养基的配置:向1640完全培养基(含胎牛血清)里加入PMA(诱导浓度:100ng/mL)、脂多糖(LPS)(诱导浓度:100ng/mL)(abs47014848)、IFN-γ(诱导浓...
(3)接种细胞:收集THP-1细胞并进行计数,用诱导培养基重悬细胞沉淀调整细胞密度为5*10^5/mL,将细胞种入六孔板,每孔加入细胞悬液2mL; (4)诱导培养:48h后,显微镜下观察巨噬细胞构建成功; (5)诱导成功的标志:单核细胞THP-1用PMA诱导后,由悬浮式生长变成贴壁生长,由圆形变成不规则形态,体积进一步增大,细胞浆疏松...
其实,这两种方法都是可以的,主要根据实验目的来选择。不过THP-1诱导为巨噬细胞后,不能继续传代增殖,所以如果需要大量细胞时,最好提前大量接种,然后再进行转染。但需要注意的是,无论采用哪种转染方法都会引起部分细胞死亡,因此培养时需要时刻注意THP-1细胞状态,诱导或转染时,最好使用处于对数生长期的细胞。不...
(3)接种细胞:收集THP-1细胞并进行计数,用诱导培养基重悬细胞沉淀调整细胞密度为5*10^5/mL,将细胞种入六孔板,每孔加入细胞悬液2mL; (4)诱导培养:48h后,显微镜下观察巨噬细胞构建成功; (5)诱导成功的标志:单核细胞THP-1用PMA诱导后,由悬浮式生长变成贴壁生长,由圆形变成不规则形态,体积进一步增大,细胞浆疏松...
最后,在无刺激物和无PMA的情况下,用无血清RPMI-1640基础培养基重悬细胞,可保持72h。 诱导步骤 THP-1诱导分化成巨噬细胞实验步骤: (1)THP-1细胞的培养:更多培养技巧可查看THP-1细胞培养攻略 THP-1(人单核细胞白血病细胞)细胞基本信息 THP-1(人单核细胞白血病细胞) ...
一、THP-1细胞的极化 1) THP-1细胞铺板,将佛波酯PMA(100 ng/ml)加入完全培养基中,诱导其向巨噬细胞的成熟; 2) 48小时后THP-1细胞成熟为巨噬细胞,外观圆形高折光,从悬浮状态快速变成贴壁状态; 3) 将成熟的巨噬细胞消化下来(Accutase酶消化:专门用于消化贴壁细胞),重新铺板,诱导向M1-like、M2-like的极化。
THP-1分化成巨噬细胞诱导攻略。为了研究巨噬细胞的功能和机制,科学家们创造了一种不需要从患者或动物采集组织的模型,即THP-1细胞。THP-1细胞系最初来自一位急性单核细胞白血病患者的血液,属于悬浮细胞,有分化为多种巨噬细胞的能力,成为巨噬细胞分化的不二之选。THP-1细胞可通过化学物质处理、细胞因子刺激或共培养...
THP-1细胞通常用佛波酯(PMA)诱导分化为巨噬细胞,然后在PMA仍然存在的情况下: 将THP-1细胞经PMA诱导为巨噬细胞后,可用RPMI-1640培养基配制氧化修饰低密度脂蛋白OX-LDL,使…
巨噬细胞进一步诱导成M1型实验步骤: (1)诱导培养基的配置:向1640wan全培养基(含胎牛血清)里加入PMA(诱导浓度:100ng/mL)、脂多糖(LPS)(诱导浓度:100ng/mL)(abs47014848)、IFN-γ(诱导浓度:20ng/mL)(abs04123),制成诱导培养基; (2)诱导培养:将已经诱导成的巨噬细胞上清弃除,加入诱导培养基(6孔板,每孔...
(4)诱导培养:48h后,显微镜下观察巨噬细胞构建成功; (5)诱导成功的标志:单核细胞THP-1用PMA诱导后,由悬浮式生长变成贴壁生长,由圆形变成不规则形态,体积进一步增大,细胞浆疏松,细胞核增大明显,可见大量明显细胞器,胞膜周围可见少量突起。 PMA诱导THP-1细胞培养的相差显微照片 用PMA孵育THP-1细胞48h,显示THP-...