THP-1 细 胞 传 代 方 法 离心法：1. 取少量细胞悬液进行计数确定细胞密度，密度80万/mL以上传代，并根据计数结果确定传代比例；2. 准备所需的培养基、离心管以及无菌枪头等；（培养基提前预热）3. 用移液器吸取培养瓶内细胞悬液转移至离心管中；4. 900-1000rpm，3min离心收集细胞；5. 在培养瓶...
THP-1细胞的传代就比较简单了。可以有两种传代方法。如果镜下观察细胞状态很好,没有其它杂质即细胞裂解物之类的,就可以采用直接传代法。传代 前将细胞培养瓶直立一个半小时使细胞自然下沉。吸弃上层少量培养液约三分之一,将余下的培养液分成两瓶,再分别补加培养液即可。如果镜下观察觉得培养液中 有杂质即可采用离...
THP-1细胞系还可以用于肿瘤相关研究,例如通过敲除特定基因如CXCR4,研究其对乳腺癌细胞迁移的影响。 THP-1细胞培养 该细胞在培养过程中,可能会有少量细胞聚集成小团生长,属于正常现象。传代时可以轻轻打散,如少许细胞已贴壁则传代时丢弃,小团生长的细胞可正常传代培养。传代时可以使用半换液法。 细胞培养步骤 ➢细...
3) 细胞传代:传代时控制细胞密度在2-4 ×105cell / mL,并在细胞生长至8-10 ×105cell / mL时进行传代。 4) 细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。 1,细胞冻存时,取上清,可使用血球计数板计数。 2,4min ,1000rpm 离心去掉上清。用配制好的细胞冻存液重悬细胞,根据细胞数量加入冻存液,轻轻混...
细胞传代:当细胞密度达到约8x10^5cells/ml左右时,即可进行传代。由于是悬浮细胞,可直接将细胞吸出,离心之后传代。传代最少浓度不应少于1x10^5 cells/ml。 细胞冻存:取差不多1x10^7个细胞,用1ml含有10%DMSO的FBS重悬,转入冻存管,于-80℃冰箱过夜。第二天移入液氮中长期保存。
"THP-1 Cells|人单核细胞白血病可传代细胞系 细胞形态:淋巴母细胞样 细胞生长:悬浮 传代的操作步骤注意事项:1)操作前要洗手,进入超净台后手要用75%酒精或0.2%新洁尔灭擦试。试剂等瓶口也要擦试。2)点燃酒精灯,操作在火焰附近进行,耐热物品要经常在火焰上烧灼,金属器械烧灼时间不能太长,以免退火,并冷却后才能...
THP-1细胞更喜欢酸性环境,在偏酸性环境中,THP-1生长得更好,所以当培养基稍微变黄(呈橘红色)时,是适合细胞生长的,此时补液或半换液即可,避免频繁离心换液。 细胞传代: 离心法: 1)将所有细胞悬液转移至离心管中,1100 rpm离心4 min 2)离心结束弃上清,用适量完全培养基轻柔混匀细胞,吸取20 ul细胞悬液进行细胞...
传代方法 建议第一代1:3传代 换液时间 2-3天换液 传代条件 当细胞密度达到约8x10^5cells/ml左右时,即可进行传代。由于是悬浮细胞,可直接将细胞吸出,离心之后传代。传代最少浓度不应少于1x10^5 cells/ml。 冻存条件 50%RPMI-1640+40%FBS+10%DMSO 三、细胞培养建议: 1.细胞复苏 将冻存管从液氮中取出后...
THP-1细胞的传代方法就比较简单了。可以有两种传代方法。如果镜下观察细胞状态很好,没有其它杂质即细胞裂解物之类的,就可以采用直接传代法。传代前将细胞培养瓶直立一个半小时使细胞自然下沉。吸弃上层少量培养液约三分,将余下的培养液分成两瓶,再分别补加培养液即可。如果镜下观察觉得培养液中有杂质即可采用离心...
传代比例:1:3-1:6,每2-3天换液一次 传代周期:24-48 h 培养条件:气相:95%空气+5%CO2,温度:37℃ 冻存条件:60%基础培养基+30%FBS+10%DMSO,液氮储存 质量检测:细菌、真菌、支原体检测均为阴性 参考文献: "Tsuchiya S, et al. Induction of maturation in cultured human monocytic leukemia cells by a ...