(3)细胞发生少量聚团时我们可以等待THP-1细胞密度扩大后改善这种情况,但发生严重聚团时我们可以提高血清(FBS)用量,或者适度吹散细胞。 (4)THP-1细胞在传代后可能会出现贴壁现象,如轻微贴壁可以轻 吹收集细胞或者丢弃贴壁的细胞,贴壁较多时,可检查培养条件是否合适。 三、THP-1细胞培养过程中复苏困难、聚团问题分析...
用PMA孵育THP-1细胞48h,显示THP-1(40X)在(A)诱导前(B)诱导后的形态学变化。它们的形态由圆形变为细长和扁平。巨噬细胞进一步诱导成M1型实验步骤:(1)诱导培养基的配置:向1640完全培养基(含胎牛血清)里加入PMA(诱导浓度:100ng/mL)、脂多糖(LPS)(诱导浓度:100ng/mL)(abs47014848)、IFN-γ(诱导浓...
THP-1细胞对血清质量有一定要求,可更换更好的血清品牌或者提高血清浓度(不超过20%,血清含量过高也会对细胞有毒性) 控制好细胞密度,不要太稀或者过密 3.冻存复苏活率低(存活率低): 因为thp-1是悬浮细胞,易受到冻存的影响,所以需要在冻存时加大细胞密度以提高复苏细胞的存活率,建议冻存时细胞密度至少在2×106...
气相条件:THP-1细胞需要在含有95%空气和5%二氧化碳(CO2)的混合气体环境中培养,以模拟细胞在体内的生长环境。温度与湿度:培养箱的温度应维持在37摄氏度,湿度通常保持在70%-80%,以确保细胞在最佳条件下生长。三、细胞传代与换液 传代方法:当THP-1细胞的密度达到80万/mL以上时,通常需要进行传代。传代时,可...
THP-1 细 胞 换 液 方 法 离心换液法:1. 准备所需的培养基、离心管以及无菌枪头等;(培养基提前预热)2. 将所有细胞悬液转移至离心管中;3. 900-1000rpm,3min离心;4. 弃上清,加5mL PBS轻轻重悬细胞进行润洗,再900-1000rpm,3min离心;Tips:此处PBS润洗是为了去除细胞碎片,平时培养若细胞...
1. THP-1细胞在偏酸性环境中生长更快,所以当培养基稍微变黄(呈橘红色)时,是适合细胞生长的,此时补液或半换液即可;2. THP-1细胞培养液中需添加β-巯基乙醇(细胞培养级别),若不添加,可能会对细胞状态造成影响;3. THP-1细胞比较难复苏,复苏初期细胞生长缓慢且会有部分细胞破碎,出现黑色细胞碎片,少量...
选择品质好的血清更有利于THP-1细胞生长 THP-1生长图片 培养攻略之收货篇 1. 常温细胞:收到细胞后,放进培养箱静置2-4小时,之后将瓶中培养基全部离心(1200rpm或250g,3分钟),去上清,用适量新鲜培养基重悬细胞,按比例接种到新培养瓶中。2. 冻存细胞:收到细胞后,如果不复苏,放进-80℃冰箱暂存或放...
图4 部分贴壁的THP-1(人单核细胞白血病细胞) 二、THP-1聚团问题 如图5所示,THP-1细胞在密度较稀时,有少量细胞聚团属于正常现象,不建议将聚团的细胞吹散,等待密度高时,细胞会自然分散开。 当细胞密度高时,聚团细胞比例高于30%时,并且细胞团呈糜烂状,细胞之间界限不清,胞体质...
1. 细胞养不好,可能的原因有,THP-1细胞特别依赖细胞浓度,ATCC上10 5到106每ML,是一个很高的密度,细胞少了就不太容易养好。 2. 细胞株的来源很重要,如直接来源于ATCC(American Type Culture Collection 美国模式菌种保藏中心)生命力要强于国内细胞库的。
RAW264.7(小鼠单核巨噬细胞白血病细胞),是由加利福尼亚索尔克研究所的W. C. Raschke在雄性BAB/14小鼠腹腔注射A-MuLV(Abelson鼠科白血病病毒)诱发肿瘤的腹水中建立的,是最常见的炎症细胞模型之一[1]。RAW264.7细胞一般为圆形或椭圆形,颜色较深,贴壁牢固。RAW264.7细胞具有较强的吞噬能力,在吞噬抗原后,细胞会释放出...