(5)诱导成功的标志:单核细胞THP-1用PMA诱导后,由悬浮式生长变成贴壁生长,由圆形变成不规则形态,体积进一步增大,细胞浆疏松,细胞核增大明显,可见大量明显细胞器,胞膜周围可见少量突起。PMA诱导THP-1细胞培养的相差显微照片 用PMA孵育THP-1细胞48h,显示THP-1(40X)在(A)诱导前(B)诱导后的形态学变化。它...
首先,了解一下THP-1的基本信息。图1 THP-1细胞生长正常图片 细胞复苏:1) 准备工作:将完全培养液置37℃水浴锅预热30分钟。2)在超净台内吸取7 mL完全培养液至15 mL离心管中 3)将细胞从干冰里取出,用镊子夹住盖子放入37℃水浴中快速晃动(注意:水不能没过盖子),使其在1分钟左右完全融化;4)将细胞悬液...
气相条件:THP-1细胞需要在含有95%空气和5%二氧化碳(CO2)的混合气体环境中培养,以模拟细胞在体内的生长环境。温度与湿度:培养箱的温度应维持在37摄氏度,湿度通常保持在70%-80%,以确保细胞在最佳条件下生长。三、细胞传代与换液 传代方法:当THP-1细胞的密度达到80万/mL以上时,通常需要进行传代。传代时,可...
THP-1 细 胞 换 液 方 法 离心换液法:1. 准备所需的培养基、离心管以及无菌枪头等;(培养基提前预热)2. 将所有细胞悬液转移至离心管中;3. 900-1000rpm,3min离心;4. 弃上清,加5mL PBS轻轻重悬细胞进行润洗,再900-1000rpm,3min离心;Tips:此处PBS润洗是为了去除细胞碎片,平时培养若细胞...
选择品质好的血清更有利于THP-1细胞生长 THP-1生长图片 培养攻略之收货篇 1. 常温细胞:收到细胞后,放进培养箱静置2-4小时,之后将瓶中培养基全部离心(1200rpm或250g,3分钟),去上清,用适量新鲜培养基重悬细胞,按比例接种到新培养瓶中。2. 冻存细胞:收到细胞后,如果不复苏,放进-80℃冰箱暂存或放...
THP-1细胞是从急性单核细胞白血病患者外周血中分离出来的单核细胞,广泛应用于单核细胞和巨噬细胞相关机制、信号通路等研究;形态和分化特性类似于原代单核细胞和巨噬细胞,在体外,常用PMA(phorbol 12-肉豆酸酯13-乙酸酯)或1α,25(OH)2D3(1α,25-二羟基维生素D3或vD3)诱导分化THP-1细胞为巨噬细胞。因此,THP-...
1. THP-1细胞在偏酸性环境中生长更快,所以当培养基稍微变黄(呈橘红色)时,是适合细胞生长的,此时补液或半换液即可;2. THP-1细胞培养液中需添加β-巯基乙醇(细胞培养级别),若不添加,可能会对细胞状态造成影响;3. THP-1细胞比较难复苏,复苏初期细胞生长缓慢且会有部分细胞破碎,出现黑色细胞碎片,少量...
THP-1细胞系是1980年建立的人单核细胞白血病细胞系,从一位患有急性单核细胞白血病的小男孩外周血中分离得到,有分化多种巨噬细胞的能力,被广泛应用于单核细胞和巨噬细胞的相关机制、免疫和炎症信号通路等研究。NOTES 细胞培养注意事项 1、该细胞冻存后复苏率较低,冻存时请酌情提高细胞量,冻存时活细胞密度不能...
1. 细胞养不好,可能的原因有,THP-1细胞特别依赖细胞浓度,ATCC上10 5到106每ML,是一个很高的密度,细胞少了就不太容易养好。 2. 细胞株的来源很重要,如直接来源于ATCC(American Type Culture Collection 美国模式菌种保藏中心)生命力要强于国内细胞库的。
THP-1是人急性单核细胞白血病细胞,是单核-巨噬细胞相关研究中的常用细胞系工具,可通过PMA(佛波酯)诱导分化为M0型巨噬细胞,然后根据实验需求进一步诱导为M1或M2型巨噬细胞。 细胞形态:悬浮细胞,圆形,大小均一,小而透亮(下图Fig1来自ATCC网站)。 注意:显微镜下观察之前,可以轻轻晃动培养瓶或孔板,静置片刻后使得细胞...