THP-1细胞为悬浮细胞且具有低密度依赖性,一般超过10^6/ml传代,比例一般为1:3/1:4,因此目前利用的两种传代方式: (1)半换液传代(不用离心):吸取培养瓶或者培养皿中的细胞移至新的培养瓶或者培养皿中,补足培养基2-3ml。 (2)传统的离心传代:将瓶子或皿中的细胞吸取至15mL离心管中,700-800rpm,离心5min;弃...
(5)诱导成功的标志:单核细胞THP-1用PMA诱导后,由悬浮式生长变成贴壁生长,由圆形变成不规则形态,体积进一步增大,细胞浆疏松,细胞核增大明显,可见大量明显细胞器,胞膜周围可见少量突起。PMA诱导THP-1细胞培养的相差显微照片 用PMA孵育THP-1细胞48h,显示THP-1(40X)在(A)诱导前(B)诱导后的形态学变化。它...
THP-1细胞对血清质量有一定要求,可更换更好的血清品牌或者提高血清浓度(不超过20%,血清含量过高也会对细胞有毒性) 控制好细胞密度,不要太稀或者过密 3.冻存复苏活率低(存活率低): 因为thp-1是悬浮细胞,易受到冻存的影响,所以需要在冻存时加大细胞密度以提高复苏细胞的存活率,建议冻存时细胞密度至少在2×106...
气相条件:THP-1细胞需要在含有95%空气和5%二氧化碳(CO2)的混合气体环境中培养,以模拟细胞在体内的生长环境。温度与湿度:培养箱的温度应维持在37摄氏度,湿度通常保持在70%-80%,以确保细胞在最佳条件下生长。三、细胞传代与换液 传代方法:当THP-1细胞的密度达到80万/mL以上时,通常需要进行传代。传代时,可...
THP-1 细 胞 换 液 方 法 离心换液法:1. 准备所需的培养基、离心管以及无菌枪头等;(培养基提前预热)2. 将所有细胞悬液转移至离心管中;3. 900-1000rpm,3min离心;4. 弃上清,加5mL PBS轻轻重悬细胞进行润洗,再900-1000rpm,3min离心;Tips:此处PBS润洗是为了去除细胞碎片,平时培养若细胞...
1. THP-1细胞在偏酸性环境中生长更快,所以当培养基稍微变黄(呈橘红色)时,是适合细胞生长的,此时补液或半换液即可;2. THP-1细胞培养液中需添加β-巯基乙醇(细胞培养级别),若不添加,可能会对细胞状态造成影响;3. THP-1细胞比较难复苏,复苏初期细胞生长缓慢且会有部分细胞破碎,出现黑色细胞碎片,少量...
THP-1 细胞系是从一名患有急性单核细胞白血病的 1 岁小男孩的外周血中分离得到的[1],自 1980 年建系以来,THP-1 细胞被广泛用于单核细胞和巨噬细胞相关的机制、信号通路以及营养和药物运输等研究中。 相对于 U937、HL-60、ML-2 等白血病细胞系,THP...
1. 细胞养不好,可能的原因有,THP-1细胞特别依赖细胞浓度,ATCC上10 5到106每ML,是一个很高的密度,细胞少了就不太容易养好。 2. 细胞株的来源很重要,如直接来源于ATCC(American Type Culture Collection 美国模式菌种保藏中心)生命力要强于国内细胞库的。
选择品质好的血清更有利于THP-1细胞生长 THP-1生长图片 培养攻略之收货篇 1. 常温细胞:收到细胞后,放进培养箱静置2-4小时,之后将瓶中培养基全部离心(1200rpm或250g,3分钟),去上清,用适量新鲜培养基重悬细胞,按比例接种到新培养瓶中。2. 冻存细胞:收到细胞后,如果不复苏,放进-80℃冰箱暂存或放...
THP-1细胞系是从一名患有急性单核细胞白血病的1岁小男孩的外周血中分离得到的,在调控组织稳态、炎症反应等方面的研究发挥着重要作用,该细胞株已被广泛用于研究单核/巨噬细胞的功能机制、信号通路、营养和药物转运、免疫应答等方面。相对于U937、HL-60、ML-2等白血病细胞系,THP-1更有类似人原代单核细胞的形态和功...