1. 由于THP-1是悬浮细胞,更易受到冻存影响,建议加大冻存密度,大约200万-300万/mL为宜,以提高复苏存活率。2. 没有程序降温盒的同学,可以选择非程序冻存液(使用前咨询试剂商是否适用于THP-1),或者按照【4℃ 20min→-20℃ 30min→-80℃ 过夜→液氮保存】的顺序手动梯度降温。培养攻略之复苏篇 复苏步...
THP-1 细 胞 换 液 方 法 离心换液法:1. 准备所需的培养基、离心管以及无菌枪头等;(培养基提前预热)2. 将所有细胞悬液转移至离心管中;3. 900-1000rpm,3min离心;4. 弃上清,加5mL PBS轻轻重悬细胞进行润洗,再900-1000rpm,3min离心;Tips:此处PBS润洗是为了去除细胞碎片,平时培养若细胞...
THP-1是人外周血的单核细胞系,最初来源于急性单核细胞性白血病患者。属于悬浮细胞,适合用于转染或感染实验。其表面抗原HLA型为:A2,A9,B5,DRw1,DRw2。 | 细胞复苏 1. 预热水浴锅至37℃ 2. 准备一个15mL离心管,加入2-3mL左右完全培养基待用 3. 将细胞从-80℃冰箱或液氮中取出后,放进一次性PE手套中,立即...
THP-1细胞为悬浮细胞且具有低密度依赖性,一般超过10^6/ml传代,比例一般为1:3/1:4,因此目前利用的两种传代方式: (1)半换液传代(不用离心):吸取培养瓶或者培养皿中的细胞移至新的培养瓶或者培养皿中,补足培养基2-3ml。 (2)传统的离心传代:将瓶子或皿中的细胞吸取至15mL离心管中,700-800rpm,离心5min;弃...
首先,了解一下THP-1的基本信息。图1 THP-1细胞生长正常图片 细胞复苏:1) 准备工作:将完全培养液置37℃水浴锅预热30分钟。2)在超净台内吸取7 mL完全培养液至15 mL离心管中 3)将细胞从干冰里取出,用镊子夹住盖子放入37℃水浴中快速晃动(注意:水不能没过盖子),使其在1分钟左右完全融化;4)将细胞悬液...
THP-1细胞(人单核细胞白血病细胞)的培养条件涉及多个方面,以下是对其培养条件的详细阐述:一、培养基与培养体系 THP-1细胞的培养体系通常使用RPMI-1640作为基础培养基,并添加10%的胎牛血清(FBS)和1%的双抗(青霉素/链霉素,P/S)以提供必要的营养和防止污染。此外,一些实验室还会在培养基中加入0.05mM的β-...
THP-1细胞可通过化学物质处理、细胞因子刺激或共培养等方法,诱导其分化为具有巨噬细胞特性的细胞群。机理 细胞因子刺激是一种常见的THP-1细胞诱导分化方法。IL-4和IL-13等细胞因子能够促使THP-1细胞分化为巨噬细胞,并启动特定的信号通路,进而调控细胞功能。这种方法可以模拟体内的免疫调节过程,并提供一种便捷的...
THP-1细胞的特点 1. THP-1细胞在偏酸性环境中生长更快,所以当培养基稍微变黄(呈橘红色)时,是适合细胞生长的,此时补液或半换液即可;2. THP-1细胞培养液中需添加β-巯基乙醇(细胞培养级别),若不添加,可能会对细胞状态造成影响;3. THP-1细胞比较难复苏,复苏初期细胞生长缓慢且会有部分细胞破碎,出现...
THP-1细胞是一种来自人类单核细胞白血病的细胞系,广泛用于研究单核细胞和巨噬细胞的生物学功能。通过不同的诱导和极化方法,THP-1细胞可以分化为类似巨噬细胞的状态,并进一步极化为不同的功能亚型。以下是常见的THP-1细胞诱导和极化方法:1. THP-1细胞的诱导分化 ...
配好的THP-1培养基与DMSO按9:1比例配制冻存液。离心后用冻存液重悬,将冻存管放入梯度冻存盒后放入-80℃冰箱。一般补液法后离心的细胞冻存3管,复苏后状态很好。 ⚠️ 注意:商品化的无血清冻存液不太适用于THP-1细胞,之前有一批偷懒用了无血清冻存液后复苏起来全嘎了。‼...