当无诱导药物存在时，TetR会与TetO结合，从而阻断下游耐药基因的表达；当有诱导药物存在时，TetR的构象会发生改变，并从TetO上脱离下来，使下游耐药基因得以表达，细菌从而获得耐药性。利用TetR和TetO特异性结合的特点，多种类型的Tet调控系统逐渐发展起来。其中，应用较广泛的为Tet-on激活型系统。Tet-on系统由调节表达...
在设计tet-on表达载体时,需要考虑以下几个方面: 1. 启动子的选择,tet-on系统通常使用tetracycline响应元件控制基因的表达,因此需要选择适合的启动子来驱动tetracycline转录激活因子(tTA)基因的表达,常用的启动子包括CMV启动子、TRE启动子等。 2. tetracycline响应元件的构建,tetracycline响应元件通常包括tetracycline响应控制...
Tet-on系统由调节表达载体和反应表达载体组成。调节表达载体包含一个人巨细胞病毒早期启动子（PhCMV）和反...
总言之，Tet系统是目前使用最广泛的药物诱导转基因表达系统之一，能够满足科研工作者在时间上控制基因表达的需求，可模拟细胞或机体生长发育不同阶段目的基因的表达变化，进而研究其中的功能和规律。汉恒生物可提供基于慢病毒载体和腺病毒载体的tet-on表达系统，欢迎联系了解咨询~参考文献 [1]. Gossen, M. and H. B...
Tet-on调控系统 利用TetR和TetO特异性结合的特点,多种类型的Tet调控系统逐渐发展起来。其中,应用较广泛的为Tet-on激活型系统。 Tet-on系统由调节表达载体和反应表达载体组成。调节表达载体包含一个人巨细胞病毒早期启动子(PhCMV)和反义Tet转录活化因子(reverse tetracycline transcriptional activator,rtTA)。其中rtTA由反...
载体容量小:AAV是我们所有病毒载体系统中装载量最小的。AAV的两个ITR之间所能容纳的最大序列长度是4.7kb。在Tet-On系统中,用于病毒包装、转导和四环素诱导的基因序列另外占用2.1kb,因此留作自定义的GOI长度需要小于2.6kb。 难以转导特定类型的细胞:当利用合适的血清型进行包装时,我们的AAV载体系统可以转导很多不同类...
两种调控系统的总结对比: (二) 应用方向 利用tet-on表达调控载体,包装成工具病毒,最后在实验中即可进行相应的基因操作,可直接感染细胞进行基因的诱导表达;也可注射动物,随后通过DOX的小鼠饲养调控工具病毒是否发挥作用。 体外-诱导型慢病毒使用-细胞实验-tet-on慢病毒 ...
Tet-on系统由调节表达载体和反应表达载体组成。调节表达载体包含一个人巨细胞病毒早期启动子(PhCMV)和反义Tet转录活化因子(reverse tetracycline transcriptional activator,rtTA)。其中rtTA由反义TetR(reverse TetR, rTetR)和单纯疱疹病毒(HSV)VP16 蛋白C端的一段转录激活区域融合而成。反应表达载体由Tet应答元件(Tet-...
Tet-On诱导型基因表达系统是控制哺乳动物细胞中目的基因定时表达的强大工具。Tet-On诱导型基因表达载体作用:当不存在四环素及其类似物(如doxycycline)的情况下,目的基因几乎或完全沉默;当往体系中添加四环素或其他类似物(如doxycycline)时,目的基因得到快速高水平表达。四环素不存在的情况下时,衍生于TeR(Tet抑制蛋白)和KRA...
我们的Tet-On诱导基因表达载体旨在在没有四环素的情况下实现GOI的几乎完全沉默,并在添加四环素时实现强而快速的表达。慢病毒诱导基因表达载体来源于第三代慢病毒载体系统。它针对大肠杆菌中的高拷贝数复制、活病毒的高滴度包装、各种细胞的高效病毒转导、高效载体整合到宿主基因组中以及高水平转基因表达进行了优化。