点击iSect Tools 点击SIGnAL T-DNA Verification Primer Design 将SALK号输入 设计好了,记录下LP与RP的序列及退火温度。 假如是自己设计,一般进行鉴定的引物距离T-DNA插入的位置300bp以上为宜。 自己设计的话需要在http://signal.salk.edu/cgi-bin/tdnaexpress查看插入方向 箭
T-DNA插入突变体的鉴定主要通过PCR技术、DNA提取和电泳鉴定来完成。实验步骤包括: 提取拟南芥的DNA,使用CTAB法将幼嫩叶片研磨成细粉,加入CTAB提取液,经过水浴和离心处理。 进行PCR扩增,使用特异引物(LP、BP、RP)扩增目的基因片段,初步鉴定突变体。 将扩增后的DNA与DNA marker一起进行琼脂糖凝胶电泳,通过凝胶成像系统观...
实验十、模式植物拟南芥T-DNA插入突变体的鉴定 下载积分: 200 内容提示: LOGO模式植物拟南芥T T- - DNA 插入突变体的鉴定西南大学 文档格式:PPT | 页数:22 | 浏览次数:41 | 上传日期:2024-03-07 08:38:52 | 文档星级: LOGO模式植物拟南芥T T- - DNA 插入突变体的鉴定西南大学 阅读...
PCR法鉴定T-DNA插入突变体本演示将介绍如何使用PCR技术鉴定植物中T-DNA插入突变体,并深入探讨该技术在基因功能研究中的应用。作者: 突变体筛选概述筛选流程T-DNA插入突变体筛选,是通过PCR技术,检测基因组中是否插入了T-DNA,并根据检测结果,筛选出目标基因的插入突变体。目的基因筛选的目标基因,需事先确定,并设计相应...
T-DNA插入鉴定实验报告.docx,1 1 / 1 文档可自由编辑 T-DNA 插入突变体的鉴定 时明辉 同组者: 薛敏 学号:202300220239 摘要 Ti 质粒是上有一段特别的 DNA 区段,当农杆菌侵染植物细胞时,该DNA 区段能自发转移进植物细胞,并插入植物染色体DNA 中。所以 Ti 质粒上的这一段
拟南芥 T-DNA 插入突变纯合体的鉴定 余振洋(高山山、 潘红芳)、 09 级生技 1 班、 200900140156、 2011/12/14 摘要 本实验通过 CTAB 法提取目 的拟南芥的 DNA, 再用三引物法 PCR 扩增所需的目 的基因后, 用电泳检测该拟南芥是否为转基因的拟南芥, 并判断其是纯合突变还是杂合突变。 关键词 拟南芥; T-...
T-DNA插入鉴定的原理 （以拟南芥为例）叶片研磨离心冰浴离心 DNA提取液 上层溶液 洗涤干燥 细胞裂解 异丙醇沉淀 DNA溶液 具体步骤 提取缓冲液：200mMTris-Hcl(PH7.4);25mMEDTA(PH8.0);250mMNacl;0.5%SDS(1)取拟南芥两片叶子，置于1.5ml离心管中，加入700ml提取缓冲液；（2）用研磨棒研磨植物材料，直至...
T-DNA 插入突变体鉴定方法主要有两种:三 引物法和双引物法。在本实验中使用三引物法。 三引物法的原理如图 1 所示,即采用三引物(LP、RP、BP)进行 PCR 扩增。野生型植株目的基因的两条染色体上均未发生 T-DNA 插入,所以其 PCR 产 物仅有 1 种,分子量约 900bp(即从 LP 到 RP);纯合突变体植株目的基因...
三引物法鉴定T-DNA插入突变体 Ti质粒是土壤农杆菌的天然质粒，Ti质粒上的特殊DNA区段，当农杆菌侵染植物细胞时，能自发转移并插入植物染色体DNA中，这一DNA区段被称为T-DNA。人们通过将Ti质粒进行改造，将感兴趣的基因放进T-DNA区段中，通过农杆菌侵染植物细胞，实现外源基因对植物的遗传转化。利用PCR...
研究者将T-DNA插入到拟南芥的D基因中,致使该基因失活,失活后的基因记为d。根据D基因、T-DNA的部分序列,设计了三种引物,如下图所示。欲鉴定某植株的基因型,应选择的