目的:构建Jurkat细胞株独特型TCR Vα1-pIRES-TCR Vβ8表达载体,转染后了解其体外表达情况.方法:根据聚合酶链反应-基因扫描(PCR-Genescan)检测Jurkat细胞株TCR Vα及Vβ亚家族表达情况,分别将其所表达的单克隆性的TCR Vα1及TCR Vβ8亚家族基因片段克隆至质粒pIRES的多克隆位点A(MCS A)和多克隆位点B(MCS B...
VR1012-TCRγV_1真核表达载体的构建 下载积分: 2990 内容提示: 为急性声损伤,而且对一些慢性声损伤或毛细胞永久缺失等内耳疾病, 需要长期向内耳导入神经营养因子患者提供了一条简单实用的用药途径 。参考文献1 RosengartT, Kuperschmid J, M aciag T, et a.l Pharmacoki -neties and distribution of heparin-...
目的:构建Jurkat细胞TCR编码基因的双基因表达载体TCRα-p I RES-TCRβ,为后期进一步克隆同种反应性高亲和力TCR提供技术支持和依据。方法:提取Jurkat细胞的 RNA,利用 RT-PCR技术获得编码Jurkat细胞TCR的全长基因序列,通过基因克隆技术构建含Jurkat细胞TCR编码基因的双基因表达载体TCRα-p I RES-TCRβ,同时利用限制性...
目的:研究双表达TCRα12-2和TCRVβ7.1基因的重组腺病毒载体感染的PBMC 对肝癌细胞的杀伤作用,为以后的TCR抗肿瘤研究奠定基础。 方法:主要包括三方面:一、腺病毒穿梭质粒pDC315-TCRα12-2-IRES-Vβ7.1 的构建。提取外周血单核细胞(peripheralbloodmononuclearcell,PBMC) ...
摘要 目的:构建含TCRγV1,基因的重组表达载体。方法:从人淋巴瘤Jurkat细胞中提取总RNA,反转录合成 eDNA克隆入VRl012质粒;转化感受态细菌E.Coli DH5a,以通用引物PCR扩增筛选阳性克隆,并双酶切鉴定;小量提取质粒进行测序。结果:测序结果证实重组载体十的外源片段序列与GenBank中TCRγV1,序列完全相符。结论:成功构建了...
金融界 2024 年 8 月 20 日消息,天眼查知识产权信息显示,北京可瑞生物科技有限公司申请一项名为“重组慢病毒载体和 293T-CD3 细胞系及其构建方法与应用“,公开号 CN202311238070.6,申请日期为 2022 年 7 月。 专利摘要显示,本发明提供一种重组慢病毒载体和 293T‑CD3 细胞系及其构建方法与应用。该重组慢病毒...
TCRγ真核表达载体基因疫苗目的:构建含TCRγV1基因的真核表达质粒并检测其在小鼠骨骼肌中的表达.方法:从人淋巴瘤Jurkat细胞中提取RNA,用RT-PCR法扩增含BamH Ⅰ与HindⅢ酶切位点的TCRγV1基因序列,将TCRγV1基因PCR产物插入pcDNA3后转化到大肠杆菌DH5α,阳性克隆酶切鉴定后测序分析.大量提取质粒,股四头肌注射...
The proliferation of K562/TCRP1 and its control cell line was detected by continuous cell counting method and CCK-8 method respectively. The drug sensitivity of the two cell lines to different concentrations of imatinib (IM) was analyzed. Results The TCR...
独特型重组质粒佐剂目的利用可同时表达两个基因片 段的pIRES作为载体,构建TCR独特型重组质粒,为制备诱导抗T细胞肿瘤免疫的TCR独特型DNA疫苗提供基础.方法设计引物,提取Jurkat及 Molt4细胞株RNA为模板,RT-PCR法特异性扩增CDR3区,与pIRES经酶切连接后氯化钙法转化,重组质粒经酶切鉴定后测序.结果构建出3种 重组质粒...
目的:构建pEGFP.C3-TCRBVl2—3表达载体并初步研究其抗肿瘤作用。方法:TCRBVl2—3基因片段从pGEM-T—TCRBVl2-3载体上酶切并克隆至pEGFP—C3载体中,通过脂质体将pEGFP—C3.TCRBVl2-3表达载体转染外周血单个核细胞(PBMCs),48小时后荧光显微镜观察转染效率。PBMCs细胞、pEGFP-C3载体转染的PBMCs细胞、pEGFP—C3...