目的:构建重组质粒TCR Vβ8/ pcDNA3.1.方法:从人淋巴瘤Jurkat 细胞中提取mRNA,经RT-PCR法获取TCR Vβ8基因;将表达质粒pcDNA3.1和TCR Vβ8基因行BamHI和HindⅢ双酶切,低熔点胶纯化,连接酶切产物,转化DH5а感受态细菌,筛选菌落和测序鉴定.结果:电泳获得523 bp的TCR Vβ8预期条带, 测序证实为正确的TCR Vβ...
目的构建EBV特异性细胞毒T细胞(c.IL)相关的,I℃R%p吡S-rI℃R邯真核双表达质粒。方法通过m: P|cR和基因扫描技术分析EBv特异性c11J克隆的T细胞受体(TcR)vd和邯谱系表达情况及T细胞克隆性,确定其优势表达 的1℃RVal5和TcRVpl亚家族基因的核苷酸序列(包括cDR3互补决定区),PcR扩增出TCRVQl5和TcR即1基因后,分别...
构建双顺反子重组质粒TCR Vα-pIRES-TCR、Vβ,转基因技术将其转染A549细胞和Molt4细胞,通过RT-PCR、实时定量PCR、流式细胞术和蛋白印迹分析检测TCR Vα15和TCR Vβ1基因的表达.结果 酶切分析和核酸序列测定证实重组质粒构建正确,转染重组质粒的细胞能够表达TCR Vα15和TCR Vβ1的mRNA及蛋白.结论 成功构建了...
通过RT-PCR,实时定量PCR,流式细胞术和蛋白印迹分析检测TCR Vα15和TCRVβ1基因的表达.结果酶切分析和核酸序列测定证实重组质粒构建正确,转染重组质粒的细胞能够表达TCRVα15和TCRVβ1的mRNA及蛋白.结论成功构建了EBV特异性的TCRVα-pIRES-TCRVβ双顺反子真核表达质粒,并在体外实现了共表达,为进一步的实验研究...