TaqMan 突变检测试剂盒采用等位基因特异性 castPCR 技术以检测和测量基因中的体细胞突变。此类产品兼容不同类型的样本,如细胞系、FFPE 组织样本、新鲜冷冻组织样本等。 了解更多 › 非编码 RNA 检测试剂盒 TaqMan 非编码 RNA 检测试剂盒提供了一种高度可靠的方法,以测量非编码长转录本的表达。此类检测试剂盒可帮助...
了解具有 RFID 的省时 TaqMan 芯片反应板 › 通过优化的预混液、试剂和试剂盒完善您的 qPCR 工作流程 › 了解我们全套 Applied Biosystems 实时荧光定量 PCR 产品系列 › 学习和支持 实时荧光定量 PCR 基础知识 不管您是实时荧光定量 PCR(也被称为定量 PCR [qPCR])的新手还是想了解实时荧光定量 PCR 的...
TaqMan荧光定量PCR(Real-time Quantitative PCR)是一种高度特异性和灵敏度的分子生物学技术,广泛应用于基因表达分析、病原体检测、突变分析等领域。其基本原理在于利用Taq DNA聚合酶的5’→3’外切核酸酶活性,在PCR扩增过程中切断特异性探针,从而释放荧光信号,实现对目标核酸序列的定量检测。一、技术原理 1. 探针...
分子信标探针在与靶序列杂交前呈现一个茎环结构,其中环部分为能与靶序列互补杂交的特异性序列,臂部分互补,荧光基团和淬灭基团分别在两臂的末端,当分子信标探针呈茎环状态时,荧光基团和淬灭基团距离极近,荧光基团被淬灭。 当PCR扩增反应产生靶序列产物,探针环部分与靶序列发生杂交,两臂距离因此拉开,两个基团间的距离不...
TaqMan实时荧光定量PCR的特点 1. 特异性强 在探针法qPCR中,除加入引物外还增加一条特异性探针,当引物和探针都与靶基因结合时,扩增时探针才会被水解酶切发出荧光;当引物发生非特异性扩增时,探针不会结合到非特异性片段上,因此不会被水解酶切而发出荧光,从而提高了特异性。2.准确度和灵敏度高 对于低拷贝或者...
Taqman一步法实时荧光RT-PCR试剂包括25×RT-PCR混合酶、2×OneStep RT-PCR Buffer和无RNA/DNA酶的水,是水解探针法进行Real Time One Step RT-PCR的专用试剂,在加入模板和引物探针后,可一步法在一管中高效率实现反转录和PCR扩增。也适用于使用玻璃毛细管的罗氏PCR扩增仪,并且不需要再添加BSA。本产品同时还...
TaqMan探针是由FAM(荧光染料)标记的探针序列和由Quencher(猝灭剂)标记的引物序列连接而成。 PCR反应过程中,引物与模板DNA特异性结合、延伸。当引物到达TaqMan探针的靶位点时,Taq聚合酶酶解TaqMan探针中FAM染料与Quencher猝灭剂之间的化学键,使FAM染料释放并荧光发出,同时探针被降解。荧光信号的強度与模板DNA浓度成正比...
实时荧光定量PCR——TaqMan探针法 TaqMan技术引物设计原则 • 序列选取应在基因的保守区段; • 避免引物自身或与引物之间形成4个或4个以上连续配对,避免引 物自身形成环状发卡结构; • 典型的引物18到24个核苷长。引物需要足够长,保证序列独特性, 并降低序列存在于非目的序列位点的可能性。 • Tm值在55-...
Taqman-PCR技术以闭管模式在PCR反应的同时检测靶基因扩增信号,从而增加检测特异性,并降低交叉污染。另外,该技术不需进一步的下游分析,缩短了检测时间。应用多色荧光检测系统,可在同一PCR反应体系中加入多对特异性引物及探针,一次扩增多个DNA...
TaqMan探针实时荧光定量RT-PCRERCC1基因变异剪接卵巢癌目的:建立应用TaqMan实时荧光定量RT-PCR技术对基因mRNA的各个变异剪接体分别进行定量检测的技术.方法:以对ERCC1的变异剪接体进行检测为例.使用TRIzol裂解新鲜手术切除的卵巢癌组织后提取总RNA,逆转录为cDNA后,PCR扩增ERCC1基因以及beta-actin基因,琼脂糖电泳分离PCR产物...