在Tag-lite技术中,用pSNAP或pCLIP与编码目标GPCR的基因构建质粒,转染入细胞后,就可表达N端融合了SNAP或CLIP的目标GPCR(见图2)。 底物(BG或BC)与HTRF荧光染料反应形成衍生物,例如与供体(Donor)铽穴状化合物(Lumi4®-Tb)形成衍生物,SANP-GPCR或CLIP-GPCR融合蛋白与其反应,则Tb被标记到GPCR上。加入受体(Accepto...
在Tag-lite技术中,用pSNAP或pCLIP与编码目标GPCR的基因构建质粒,转染入细胞后,就可表达N端融合了SNAP或CLIP的目标GPCR(见图2)。 底物(BG或BC)与HTRF荧光染料反应形成衍生物,例如与供体(Donor)铽穴状化合物(Lumi4®-Tb)形成衍生物,SANP-GPCR或CLIP-GPCR融合蛋白与其反应,则Tb被标记到GPCR上。加入受体(Accepto...
降低工作量.SNAP-tag技术是一种翻译后的标签标记技术,可以将荧光标记到目的蛋白,而不会产生自发荧光或改变GPCR功能.该方法快速,简单,需要细胞数量少,并且可以提供精确的定量信息.对需要鉴定的细胞克隆采用Tag-lite SNAP-Lumi4-Tb进行标记,以激发波长343 nm,发射波长620 nm进行检测,获得的荧光值即代表UT的表达水平....
利用tag-lite结合分析实验技术筛选腺苷a2a受体配体的方法,该方法包括如下步骤: 步骤一,构建特定标签融合的目的细胞膜表面蛋白表达载体,所述载体为snap-tag,clip-tag或halotag融合的目的蛋白中的一种; 步骤二,利用tag-lite技术将构建好的载体转染细胞使其表达此融合蛋白,所述tag-lite技术兼容瞬时转染细胞或稳转细胞株;...