4. Tag-lite Buffer (5X concentrate), 100 mL (Revvity Part# LABMED) 5. 微孔板 6. HTRF 认证的酶标仪 一:饱和结合实验(KD测定) 将荧光配体滴定到含有固定量标记细胞的溶液中,然后孵育达到平衡。从该滴定实验中获得的 HTRF ⽐率即为总结合信号。 使用未标记配体作为阴性对照,以说明标记配体与受体、非...
在Tag-lite技术中,用pSNAP或pCLIP与编码目标GPCR的基因构建质粒,转染入细胞后,就可表达N端融合了SNAP或CLIP的目标GPCR(见图2)。 底物(BG或BC)与HTRF荧光染料反应形成衍生物,例如与供体(Donor)铽穴状化合物(Lumi4®-Tb)形成衍生物,SANP-GPCR或CLIP-GPCR融合蛋白与其反应,则Tb被标记到GPCR上。加入受体(Accepto...
不仅如此,GLP-1R还能够通过调控cAMP反应元件结合蛋白(CREB)和蛋白复活因子Bcl-2、Bcl-XL等来抑制细胞凋亡。 均相时间分辨荧光技术(Homogeneous Time-Resolved Fluorescence , HTRF)是一种用来检测纯液相体系中待测物的方法。HTRF结合了荧光共振能量转移(Fluorescence Resonance Energy Transfer , FRET)和时间分辨荧光(Time...
利用Taglite结合分析实验技术筛选腺苷A2A受体配体的方法,该方法包括如下步骤:构建特定标签融合的目的细胞膜表面蛋白表达载体;使用HTRF荧光基团供体共价结合的标签特异性底物标记标签融合细胞膜表面蛋白;将标记的细胞或细胞膜与结合配体进行孵育,孵育后进行HTRF的检测,根据数据结果计算待测样品的Kd或Ki值.本发明的优点在于:...
We present a new Tag-lite(;) ligand-binding assay targeting LGICs on living cells. This technology combines the use of suicide enzyme tags fused to channels of interest with homogeneous time-resolved fluorescence (HTRF(;)) as the ... E Blanc,P Wagner,F Plaisier,... - 《Analytical Bioche...
HTRF结合了荧光共振能量转移(Fluorescence Resonance Energy Transfer , FRET)和时间分辨荧光(Time-Resolved Fluorescence , TRF)两种技术,将FRET的均相实验方式和TRF的低背景特性融合在一起,提供了更高的灵敏度和稳定性,是高通量药物筛选的神器。 SNAP标签蛋白,可特异与底物通过苄甲基不可逆共价结合,其底物分别为苄甲基...
Tag-lite是SNAP-Tag与HTRF技术相结合,用来进行活细胞表面受体分析的一种技术。SNAP技术由Covalys公司开发出来,并由NEB公司实现商品化。 SNAP和CLIP是小的融合标签蛋白,可特异地与底物通过苄甲基不可逆共价结合,其底物分别为苄甲基鸟嘌呤(BG)和苄甲基胞嘧啶(BC)。由于底物可与各种染料形成衍生物,这样,通过共价反应,染...
Combining HaloTag® labeling method with Tag-lite® technology to characterize GPCR heterodimers at the surface of living cells.The G Protein-Coupled Receptors (GPCRs) make up the largest protein family in the human genome. GPCRs are membrane receptors which transmit signals from a wide range...
Combining HaloTag® labeling method with Tag-lite® technology to characterize GPCR heterodimers at the surface of living cells. 来自 htrf.iba.globulevs.com 喜欢 0 阅读量: 24 作者:N Tinel,N Douayry,E Dupuis,F Maurin,E Bourrier,L Lamarque,H Mokrane,M Mazille,M Fink,E Trinquet ...
The tag can then be labeled with an HTRF(R) fluo- rophore.The present poster summarizes the results of the imple- mentation of the Tag-liteTM technology on Tecan's Infinite(R) F500 filter-based multimode reader, using a cell-based as- say to monitor the binding of vasopressin to the ...