T4 DNA连接酶的最佳反应温度为37℃,但在使用T4 DNA连接酶催化DNA黏性末端的连接反应时,通常将反应温度设定在16℃或者更低,请解释原因。相关知识点: 试题来源: 解析 线性DNA的末端存在末端绽裂现象,即DNA末端的双链结构存在一定程度的解链,温度越高,解链现象越严重。这也就阻碍了两个DNA片段的黏性末端互补碱基间...
百度试题 题目T4连接酶连接切口DNA的最佳反应温度是37℃。相关知识点: 试题来源: 解析 对 反馈 收藏
T4 DNA连接酶的最佳反应温度为37℃,但在使用T4 DNA连接酶催化DNA黏性末端的连接反应时,通常将反应温度设定在16℃或者更低,请解释原因。 答案:线性DNA的末端存在末端绽裂现象,即DNA末端的双链结构存在一定程度的解链,温度越高,解链现象越严重。这也就阻碍了两个D... 点击查看完整答案 你可能感兴趣的试题 问答题...
反应温度:该酶的最适温度为37℃,由于热稳定性较差,因此长时间反应时通常需在16℃下进行。若反应1～2小时左右的话也可在室温下进行反应。 抑制剂:T4 DNA连接酶要求Mg2+,因此螯合Mg2+的EDTA的存在会阻碍反应。将溶解于含有高浓度EDTA缓冲液中的DNA准备作为样品使用时,最好先用灭菌蒸馏水或TE缓冲液进行置换。 图...
16度温度合适。T4酶的最适温度是37°，但是在37°下DNA分子振动过于剧烈，碱基配对形成的氢键不稳定，所以就采用16度。
1、反应温度 温度是影响DNA连接效率的主要因素。连接酶的最佳反应温度是37℃，但是在这个温度下，粘性末端之间退火形成的氢键结合是不稳定的。因此，连接粘性末端的最适温度一般认为4~16℃比较合适。平末端连接反应受温度的影响较小，连接反应的最适温度为10~20℃，一般可在室温下进行，但温度过高（>30...
我知道T4 DNA ligase的最佳反应温度是16℃,可以连过夜,那么酶的作用时间大约为多长呢?是只有几个小时...
Taq DNA连接酶反应温度45~65℃,Tma DNA连接酶反应温度60℃。Taq DNA连接酶保真性比T4 DNA连接酶、E.coli DNA连接酶高很多。TthDNA连接酶保真性比T4 DNA连接酶高24倍。Tth DNA连接酶具有3’-5’外切活性,可以切去与模板非匹配碱基。Tth DNA连接酶的保真性较高,可能与Tth DNA聚合酶3’-5’外切活性较低有...
T4DNA连接酶是经原核表达,柱层析纯化获得的高纯T4DNA接酶,SDS-PAGE显示为一条62kD的蛋白条带。本品附带10xLigationBuffer含有ATP。适用于DNA片断接、克隆等各种反应。连接条件: 推荐在10~20μl反应体系中进行接反应,反应中DNA浓度可达1mM(1kbDNA约1mg/ml)。首先混合要接的DNA片段,加入10×Ligase Buffer至终浓度为...
没影响的，T4DNA连接酶的最佳反应温度是16℃，一般4℃可以过夜的