一、tail-pcr,其主要原理是基于一端的特异巢式引物和另一端随机简并引物,经过多轮扩增可以分离出侧翼序列;二、反向pcr,这种方法主要是对基因组dna进行酶切,然后进行自连,通过载体上的特异引物进行侧翼序列分离;三、接头pcr,其主要原理与反向pcr类似,不同的是酶切基因组dna以后加接头连接代替自连,在扩增过程中用接头的一端引物和载体一
TAIL-PCR技术起初被用来分离P1和YAC克隆插入末端序列（Liu和Whittier，1995），经过改进后用于分离拟南芥T–DNA插入侧翼序列（Liu等，1995）。其基本原理是利用多个嵌套的插入序列特异性引物（Special Primer，SP）分别和较短的、Tm值较低的任意简并引物（Arbitrary Degenerate Primer，AD Primer）组合，特异引物的Tm值...
马铃薯薯形突变体T-DNA插入侧翼序列分析
一种快速·有效分离T-DNA插入位点的侧翼序列的方法--DW-ACP-PCR技术,一种快速·有效分离T-DNA插入位点的侧翼序列的方法-&#x..
通过DNAwalking技术获取T—DNA左边界侧翼序列 3条、右边界侧翼序列1条。经Blast分析,在GenBank中找到有一定相似性的序列。这是花生上 应用T—DNA标签法的首次尝试。 关键词:花生;高蛋白转化体;T—DNA侧翼序列;分析 中图分类号:$565.2 Q782 文献标识码:A IsolationofPeanutDNASequencesFlankingT—DNAInsertionSites...
水稻抗白叶枯病T-DNA插入突变体侧翼序列的分离和分析
摘要 通过激活标签技术(activation tagging)得到突变群体是构建突变体库的一种重要方法,应用此种方法研究基因功能,不管是用正向或反向遗传学方法,都必须先获得插入位点的侧翼序列(flanking sequence...展开更多 作者 崔萌萌 机构地区 中国农业科学院烟草研究所 出处 《中国烟草科学》 CSCD 2012年第6期109-111,共...
致病力丧失突变子t一2430的T—DNA插入位点侧翼序列,得到大小为476bp的一段序列。BLAST比对已测序炭疽菌 基因组,发现401nt和数据库的Contig464的部分序列完全一致,进一步对该段序列的功能进行预测,表明T_DNA插入 在一预测基因的启动子区域,并且这个预测基因与稻瘟病菌(Magnaportheoryzae)的天冬氨酸转氨酶(XP_003719674.1...
东方百合T—DNA插入突变株侧翼序列的分离及分析
1.2.4 转基因甘蔗BtG-2事件特异性PCR检测及其灵敏度 BtG-2事件特异性PCR检测的建立:根据T-DNA左右两侧翼序列的测序结果,以及已知的T-DNA左右端载体序列分别设计3对左、右侧特异性检测引物:LS060/LA451、LS011/LA451、LS060/LA585和RS160/RA477、RS129/RA477、RS160/RA588,对转基因甘蔗BtG-2进行扩增,分别筛...