原理: T-DNA是农杆菌Ti质粒中的一段DNA序列,可以从农杆菌中转移并稳定整合到植物核基因组中。人们将目的基因插入到经过改造的T-DNA区,借助农杆菌的感染实现外源基因向植物细胞的转移与整合,获得转基因植物。除用于转基因以外,T-DNA插入到植物的基因中,基因由于发生碱基的插入或缺失而发生突变。
拟南芥 T-DNA 插入突变纯合体的鉴定 余振洋(高山山、 潘红芳)、 09 级生技 1 班、 200900140156、 2011/12/14 摘要 本实验通过 CTAB 法提取目 的拟南芥的 DNA, 再用三引物法 PCR 扩增所需的目 的基因后, 用电泳检测该拟南芥是否为转基因的拟南芥, 并判断其是纯合突变还是杂合突变。 关键词 拟南芥; T-...
目前，人工诱变拟南芥常用的方法有EMS诱变、T-DNA插入突变、激活标签等。T-DNA插入突变Ti质粒是土壤农杆菌的天然质粒，该质粒上有一段特殊的DNA区段，当农杆菌侵染植物细胞时，该DNA区段能自发转移，插入植物染色体DNA中，Ti质粒上的这一段能转移的DNA被叫做T-DNA。人们根据这一现象，将Ti质粒进行改造，将感兴趣的...
(1) 诱变(2) 农杆菌转化法;1 质粒;T-DNA(3) 限制酶和 DNA 连接酶(4) 植物组织培养;无菌;愈伤组织(5) 结合形成双链 RNA;多聚半乳糖醛酸酶基因的表达23 (1) 分裂(或增殖)分化 相关知识点: 试题来源: 解析 [解析]离体的组织或器官经过脱分化形成愈伤组织,再通过再分化即细胞的分裂和分化形成...
1、 拟南芥T-DNA插入突变体的鉴定摘要:我们用CTAB法提取拟南芥的T-DNA插入突变体的DNA,然后用三引物法进行PCR和琼脂糖凝胶电泳来判断其为突变纯合体还是突变杂合体。通过这次实验,我们掌握了如何来判断纯和突变和杂合突变。关键字:拟南芥 T-DNA插入突变 突变体的鉴定前言: 拟南芥 拟南芥是十字花科的植物,它是植物...
在DNA复制过程由于碱基类似物的取代,碱基的化学修饰以与碱基的插入和缺失都会引起突变。〔2〕物理诱变,利用物理因素引起基因突变的称物理诱变,如X射线、紫外线、电离辐射等物理因素可造成 〔3〕T-DNA插入,改变读码或变成假基因。〔4〕移码突变:基因中插入或者缺失一个或几个碱基对,会使DNA的阅读框架〔读码框〕...
将感兴趣的基因改造插入到T-DNA区段中,通过农杆菌侵染植物细胞,实现外源基因对植物的遗传转化,得到含有突变的植株。本实验即检测所得植株是否为T-DNA的插入突变体。 1.引言 Ti质粒是土壤农杆菌的天然质粒,该质粒上有一段特殊的DNA区段,当农杆菌侵染植物细胞时,该DNA区段能自发转移进植物细胞,并插入植物染色体DNA...
基因沉默在线虫的突变体库构建中得到成功应用,但并不适合于植物, T―DNA 插入突变能方便地进行正向和反向遗传学研究,因而受到重视[1]。同时, 基因组测序工作的完成使得从位点到表型的反向遗传学研究成为可能,从而使通 过T―DNA插入技术构建突变体来研究功能的反向遗传学技术逐渐取代了传统的 化学诱变、图位克隆等...
植物突变群体的构建方法有多种 包括物理诱变、化学诱变、插入突变、基于基因沉默的突变群体的构建。其中 插入突变是将外源的已知插入元件随机插入植物基因组中 引起插入位点基因的变化 影响其正常表达 进而引起植株在表型上的变化 产生插入突变体 并以此插入元件为标记来分离和克隆因插入而失活的基因 对该基因进行反向和...
通过T-DNA插入技术构建突变体来研究功能的 反向遗传学技术逐渐取代了传统的化学诱变、图位 克隆等技术。 1T-DNA标签载体的发展 T-DNA插入技术中关键是T-DNA标签载 体。T-DNA标签载体随着研究不断被改造革新, 主要经历了3次革新。 (1)启动子标签载体:这是最初的T-DNA标 ...