T-DNA可随机插入植物基因组内,导致被插入基因发生突变.用此方法诱导拟南芥产生突变体的过程如下:种植野生型拟南芥,待植株形成花蕾时,将地上部分浸入农杆菌(其中的T-DNA上带有抗除草剂基因)悬浮液中以实现转化.在适宜条件下培养,收获种子(称为T 1 代). (1)为促进植株侧枝发育以形成更多的花蕾,需要去除 ,因为...
植物提取物可以以ATP依赖的方式将T-DNA连入模拟靶序列,表明T-DNA整合取决于植物连接酶。但是,进入植物细胞的T链可能没有直接连接到植物基因组的断裂上。相反,T链可以被宿主DNA聚合酶复制,并且可以在复制过程中连接到基因组。 T-DNA在整合到植物基因组时可能发生单插入(在一个基因座上)或多插入(在多个基因座上)...
( 3 ) 过程 ③ 是将表达载体导入农杆菌细胞, 常用 Ca 2+ ( CaCl 2 溶液 ) 处理使农杆菌成为感受态细胞。检测农杆菌和愈伤组织细胞中是否有目的基因常采用 DNA 分子杂交技术, 检测农杆菌和愈伤组织细胞中是否有目的基因 的 转录产物常采用 分子杂交技术。 ( 4 ) 过程 ④ 表示从植物组织中获取原生质体, 需...
1.农杆菌感染:首先需要将含有目标外源基因的质粒导入到农杆菌中,然后利用农杆菌的特殊途径将质粒中的T-DNA片段转移到植物细胞中。 2. T-DNA整合:一旦T-DNA片段进入到植物细胞中,它会与植物基因组中的某个位置发生重组,从而将外源基因整合到植物基因组中。这个过程是随机的,T-DNA片段可以整合到植物基因组的不同...
T-DNA是Ti质粒上的片断,包含三个重要的基因,当整合到宿主细胞(主要是双子叶植物)时分别诱发根瘤,opine化合物的合成和抑制细胞分化。Ti质粒因为自身一些优点很适合作为导入外源基因的载体。而外基因就是整合到T-DNA上的。 农杆菌介导植物转化过程的分子事件。
T-DNA进入细胞核后，靶向植物基因组进行整合。整合前，VirE2从T链解离，T-DNA最终整合至植物基因组。整合过程是随机的，不针对特定基因组区域。实验室条件下，获得转基因后代通常需选择性筛选，鉴定阳性转化苗。转基因后代可能含有沉默的转基因。T-DNA整合随机性可能导致基因表达变异，影响转基因事件的评估...
农杆菌侵染植物细胞后,能将Ti质粒上的T﹣DNA插入到植物基因组中.图示为利用农杆菌培育转基因植物的基本流程,请据图作答:(1)剪除Ti质粒的某些片段、替换复制原点O与添加抗生素的抗性基因T的过程①中,需用 处理DNA以防止DNA片段的自身环化,需用 “缝合”双链DNA片段的平末端.(2)目的基因是指编码蛋白质的结构基因...
T-DNA导入植物基因组的分子机理 整个过程大致包括:(1)农杆菌对受体的识别与附着;(2)农杆菌对特异的植物信号分子的感应;(3)virG介导的信号传导及毒性基因（Vir）的活化;(4)Vir蛋白作用产生T-DNA单链;(5)Vir蛋白转移复合体的形成及T-DNA和毒性蛋白进入宿主胞质;(6)成熟T-复合物的形成及其核输入(7)T-DNA整合...
解:A、过程①②需要使用DNA连接酶和多种限制酶,不需要DNA聚合酶,A错误; B、将目的基因导入微生物细胞常用感受态转化法,即用Ca2+处理微生物细胞使之成为易于吸收周围环境中DNA分子的感受态,因此过程③常用Ca2+处理使农杆菌成为感受态细胞,B正确; C、过程④用酶解法去除植物细胞的细胞壁,即用纤维素酶和果胶酶去除植...
13.农杆菌侵染植物细胞后,能将Ti质粒上的T-DNA插入植物基因组中。图示为利用农杆菌培育转基因植物的基本流程,请据图回答:目的基因②③T-DNA ①T-DNA T 改造T 载体农杆菌培养Ti质粒愈伤组织试管苗植物细胞原生质体(1)剪除Ti质粒的某些片段、替换复制原点O与添加抗生素的抗性基因T的过程①中,需用多种限制酶处理,...