如果在实验中观察到活细菌同时发出红色和绿色荧光,可能是由于PI染色时间过长导致的假阳性结果。此时,建议减小PI浓度或减少PI染色时间,并检查荧光显微镜的滤块选择是否正确。 综上所述,PI/SYTO9染料在适当的条件下是可以见光的,但需要注意避免长时间强光照射,以确保实验结果的准确性和染料的稳定性。
1.细胞染色:SYTO 9具有细胞膜渗透性,能够很好地渗透进入原核和真核细胞膜,广泛与细胞核、细胞质及线粒体内的DNA和RNA结合发出明亮的绿色荧光。2.细菌活死染色:SYTO 9常与碘化丙啶(PI)联合使用,用于区分活细菌和死细菌,评估细菌的存活率或药物对细菌的影响。3.RT-PCR、DNA熔解曲线分析及环介导恒温扩...
本试剂盒的工作原理在于:SYTO 9和PI的光谱特征以及穿透健康细菌细胞的能力不同。单独使用时,SYTO 9能对群体内的所有细菌进行标记—具有完整膜和受损膜的细菌;相反,PI只能渗透进入受损的膜,PI的插入会引起SYTO 9染色荧光的降低,当体系内加入两种染料时。因此,通过适量比例的SYTO 9和PI的混合染色,具有完整膜结构的细...
染色原理:SYTO-9是一种能够透过细胞膜的绿色荧光核酸染料,可用于活的和死的真核细胞的RNA和DNA染色,以及革兰氏阳性和革兰氏阴性细菌。PI是一种可对DNA染色的细胞核染色剂,在嵌入双链DNA后释放红色荧光。PI不能穿透完整细胞膜,但对凋亡晚期细胞和死细胞的破...
为了全面优化染色条件,建议测试梯度浓度的SYTO 9,每一种浓度与梯度浓度的PI进行组合染色。建议按照1ml细菌悬液加入3µl不同混合比率的染料预混液。 三、荧光显微镜操作步骤 活菌和死菌的荧光可能用标准的荧光素长通滤片设置来同时观察。替代方案的话,活菌(绿色荧光)和死菌(红色荧光)可分别用荧光素和Texas Red...
本制品是利用SYTO9绿色核酸染料和碘化丙啶(PI)红色荧光核酸染料来进行细菌活力检测的试剂盒。 SYTO9能对所有待测细菌(活菌+死菌)进行标记,而PI只能渗透进入到细胞膜受损的死菌,故在活菌中只有SYTO染料,故呈绿色荧光,而在死菌中同时有SYTO9和PI两种染料,故细菌呈红色荧光。在荧光显微镜下通过颜色即可分开两类...
使用SYTO9和PI染色细菌时,若观察到活细菌既有红色荧光,又有绿色荧光,可能需要检查荧光显微镜的滤块选择是否正确。荧光显微镜利用荧光特性进行观察,其滤块包括激发滤片、发射滤片和二向分光镜,三者共同作用实现荧光成像。在荧光成像中,激发滤片选择激发光,同时阻挡其他波长的光。通过激发滤片的光经过二向...
死细菌活细菌染色试剂盒(Syto9-PI法)是利用 SYTO9 绿色核酸染料和碘化 丙啶(PI)红色荧光核酸染料来进行细菌活力检测的试剂盒,其原理是 SYTO9 能对 所有待测细菌(活菌+死菌)进行标记,而 PI 只能渗透进入到细胞膜受损的死菌,故 在活菌中只有 SYTO 染料,故呈绿色荧光,而在死菌中同时有 SYTO9 和 PI 两种...
SYTO9 标记的HeLa活细胞 利用共聚焦显微镜分析SYTO9/PI染色 实验步骤注意:我们推荐的染料工作浓度是基于已有文献与自身实验室经验,客户应根据具体的细胞类型和实验系统对染料的最佳工作浓度进行优化。1.用塑料试管稀释 SYTO 9 Green Nucleic Acid Stain(因为稀释后的染料对玻璃有附着性)。如果希望获得最佳的染色效果...
单独使用时,SYTO 9能对群体内的所有细菌进行标记—具有完整膜和受损膜的细菌;相反,PI只能渗透进入受损的膜,PI的插入会引起SYTO 9染色荧光的降低,当体系内加入两种染料时。因此,通过适量比例的SYTO 9和PI的混合染色,具有完整膜结构的细菌呈绿色荧光,而具受损膜结构的细菌呈红色荧光。两者染料的最和发射波长分别是40...