1.操作简便：SYBR Green I荧光染料法实质上是在常规的PCR反应中添加了荧光染料，借助染料和双链DNA的结合所发出的荧光实时监控反应的进程。由于不需要设计序列特异性探针和优化反应条件，操作简便易行。2.成本低廉：与需要设计特异性探针的荧光定量检测法相比，SYBR Green I法的成本较低，适合大规模高通量的实验。3.
荧光特性：在游离状态下，SYBR Green I发出微弱的荧光，但一旦与双链DNA结合后，其荧光大大增强，增强幅度可达800~1000倍。核酸染色：SYBR Green I可与双链DNA（dsDNA）结合，用于琼脂糖凝胶及聚丙烯酰胺凝胶中的双链DNA检测。它也可以和双链RNA（dsRNA）结合，和单链RNA或单链DNA的结合力较弱。PCR产物分析：其...
【SYBR Green I法引物设计要点】在运用SYBR Green I染料法进行qPCR实验时，引物设计相较于普通PCR扩增引物，需要额外注意以下几个关键原则：1、在运用SYBR Green I染料法进行qPCR实验时，首要原则是选择具有高度特异性的引物对，以确保扩增产物不会形成二级结构。2、扩增的熔解温度（Tm）应控制在约60℃，因为这是SYB...
一.SYBR Green I法原理 1.Sybr Green I是一种结合于小沟中的双链DNA结合染料,在PCR反应体系中,Sybr荧光染料特异性地掺入DNA双链与双链DNA结合后,发射荧光信号,而不掺入双链中的Sybr染料分子不会发射任何荧光信号。从而保证与PCR产物的增加完全同步。 2.利用荧光染料可以指示双链DNA熔点的性质,通过熔点曲线分析...
SYBR Green I 是一种结合于所有 dsDNA (双链DNA)双螺旋小沟区域的、具有绿色激发波长的嵌合型核酸染料, dsDNA 结合亲和力较高。 SYBR Green I法原理示意图 在游离状态下,SYBR Green I 发出微弱的荧光,但一旦与双链 DNA 结合后,荧光强度可增强至几百倍。因此,SYBR Green I 的荧光信号强度与双链 DNA 的数量...
1、 DNA结合染料—SYBR Green I 法 • 原理:SYBR Green I 是一种DNA结合染料,其与双链DNA结合后,荧光大大增强,DNA与染料结合所释放的荧光量与dsDNA的数量成正比。因此,检测到的荧光信号可反映出PCR体系存在的双链DNA数量。 • 特征:可逆荧光,最大吸收波长497nm,最大发射波长520nm。
Sybr Green I的定量检测原理是:在Sybr Green I染料的体系中,双链DNA和Sybr Green I结合之后,会使染料发出一种特殊的荧光,当基因发生复制时,双链DNA会越来越多,Sybr Green I染料中结合的双链DNA会越来越多,随之形成新的染料-DNA复合物,同时使荧光发射强度增加。最终,通过荧光定量仪记录荧光的强度,就可以获得目的...
SYBR Green，又名SYBR Green I，是一种荧光染料，正是因为它，才使得Real-Time PCR能够实现定量检测，取得了极大的成功。二、SYBR Green荧光染料的原理 SYBR Green是一种荧光染料，可以被用于Real-Time PCR技术，并能反映在PCR过程中特定DNA基序列扩增的变化。SYBR Green染料是一种可被氨基酸体系吸收的荧光染料，...
qPCR染料法的原理 qPCR染料法在体系中额外加入了非特异性双链DNA荧光染料(通常为SYBR Green I),游离的荧光染料本身不发光或只发出极弱的荧光信号,但染料可以非特异地结合在双链DNA小沟上,并发出较强的荧光信号。随着PCR循环数的增加,越来越多的染料与双链DNA结合,产生的荧光量与双链DNA含量成正比。因此可以通过检...