Green I时应根据实际情况优化使用浓度，反应的终浓度为0.2×到1×之间。 镁离子浓度的影响 提高镁离子浓度可以降低SYBR Green I对PCR反应的抑制作用。我们建议在用SYBR Green I进行荧光PCR反应时，镁离子浓度比无SYBR Green I的普通PCR反应高出0.5～3mM。保存条件：-20℃避光保存，有效期12个月。
我们建议在用SYBR Green I进行荧光PCR反应时,镁离子浓度比无SYBR Green I的普通PCR反应高出0.5～3mM。 使用时,配置PCR反应混合液,将10000×SYBR Green I浓缩液加入到PCR反应体系,使终浓度为0.5×(0.2～1×之间调整)。以上操作建议在冰上进行。注:① 反应液配制方法和PCR扩增条件请参照DNA聚合酶使用说明。② ...
2.添加SYBR Green I染料:将SYBR Green I染料加入PCR反应体系中。通常建议的最终浓度为1×至10×的工作浓度。 3.使DNA与染料结合:将PCR反应体系在恒温条件下进行PCR反应,可使SYBR Green I染料与DNA结合。PCR反应过程中,SYBR Green I染料会通过排除细胞质内的RNA和其他杂质,选择性地结合到DNA分子上。 4.执行PCR...
后染方法则是在电泳后进行。以TAE、TBE或TE的pH 7.0-8.5缓冲液稀释SYBR Green I浓缩液，比例为10000：1，混匀后制成染色溶液。将溶液倒入聚丙烯或预先硅烷化处理过的玻璃平皿中，染色时间根据凝胶浓度和厚度调整，通常为10-30分钟。对于聚丙烯酰胺凝胶，可以将工作液直接倒在处理过的玻璃板上，染色...
SYBR Green I的使用浓度是保证荧光定量PCR实验成功非常关键的因素。如果SYBR Green I的浓度过低会使荧光信号的变化降低,这就意味着低拷贝的样品可能无法检出;而在高浓度时,将会抑制PCR反应,降低PCR反应效率。所以一般在使用SYBR Green I时应根据实际情况优化使用浓度,反应的终浓度为0.2×到1×之间。 镁离子浓度的...
SYBR Green 荧光染料荧光定量 PCR 的试验成功有很多因素,但是 SYBR Green I 的使用浓度是非 常关键的因素 ,如果 SYBR Green I 的浓度过低会使荧光信号的变化降低。这就意味着低拷贝 的样品可能无法检出;而在高浓度时,将会抑制 PCR 反应。降低 PCR 反应效率。所以一般在使 用 SYBR Green I 时应根据实际情况优...
SYBR Green I 的使用浓度是影响实验成功与否的关键因素,如果SYBR Green I的浓度不饱和会使荧光信号不能反应产物量的变化。而过高浓度则会抑制PCR反应,降低PCR反应效率。通常试剂盒会有比较现成的方案。提高镁离子浓度可以降低SYBR Green I对PCR反应的抑制作用。在用SYBR Green I进行荧光PCR反应时, 镁离子浓度要比无...
使用时,配置PCR反应混合液,将10000×SYBR Green I浓缩液加入到PCR反应体系,使终浓度为0.5×(0.2×到1×之间调整)。以上操作建议在冰上进行。 注:①反应液配制方法和PCR扩增条件请参照DNA聚合酶使用说明。 ②Realtime PCR扩增仪的使用方法,请参照各仪器说明书。
2×SYBR Green PCRmix 含有PCR Buffer 、MgCl 2、dNTPs 、HS Taq DNA Polymerase 、SYBR Green I 、稳定剂等成分。产品简介：2×SYBR Green PCRmix 是采用SYBR Green І嵌合荧光法进行Real Time PCR 的专用试剂。含有常温下完全封闭Taq 酶活性的化学修饰法热启动HS Taq DNA Polymerase ，能够有效抑制低温条件...