1.操作简便：SYBR Green I荧光染料法实质上是在常规的PCR反应中添加了荧光染料，借助染料和双链DNA的结合所发出的荧光实时监控反应的进程。由于不需要设计序列特异性探针和优化反应条件，操作简便易行。2.成本低廉：与需要设计特异性探针的荧光定量检测法相比，SYBR Green I法的成本较低，适合大规模高通量的实验。3....
qPCR染料法的原理 qPCR染料法在体系中额外加入了非特异性双链DNA荧光染料(通常为SYBR Green I),游离的荧光染料本身不发光或只发出极弱的荧光信号,但染料可以非特异地结合在双链DNA小沟上,并发出较强的荧光信号。随着PCR循环数的增加,越来越多的染料与双链DNA结合,产生的荧光量与双链DNA含量成正比。因此可以通过检...
• 原理:SYBR Green I 是一种DNA结合染料,其与双链DNA结合后,荧光大大增强,DNA与染料结合所释放的荧光量与dsDNA的数量成正比。因此,检测到的荧光信号可反映出PCR体系存在的双链DNA数量。 • 特征:可逆荧光,最大吸收波长497nm,最大发射波长520nm。 • 适用情况:非特异性的荧光染料,不能识别特定的双链,只...
2、SYBR Green I染料法通过SYBR Green I染料与PCR过程中产生的双链DNA结合,而对聚合酶链反应(PCR)的产物进行检测。工作原理:1.步骤、过程1)当SYBR Green I染料被加入到样品中后,它可立即与样品中的双链DNA进行结合 。2)在PCR过程中,Applied Biosystems AmpliTaq Gold DNA聚合酶可对目标序列进行扩增,以产生PCR...
SYBR Green I方法是目前最为常见的荧光染料,其作用原理为:SYBR Green I是一种只与双链DNA小沟结合的染料,并不与单链DNA链结合,而且在游离状态不发出荧光,只有掺入DNA双链中才可以发光,因此,在PCR体系中,随着特异性PCR产物的指数扩增,每个循环的延伸阶段,染料掺入双链DNA中,其荧光信号强度与PCR产物的数量呈正相...
一.SYBR Green I法原理 1.Sybr Green I是一种结合于小沟中的双链DNA结合染料,在PCR反应体系中,Sybr荧光染料特异性地掺入DNA双链与双链DNA结合后,发射荧光信号,而不掺入双链中的Sybr染料分子不会发射任何荧光信号。从而保证与PCR产物的增加完全同步。
一.SYBR Green I法原理 1.Sybr Green I是一种结合于小沟中的双链DNA结合染料,在PCR反应体系中,Sybr荧光染料特异性地掺入DNA双链与双链DNA结合后,发射荧光信号,而不掺入双链中的Sybr染料分子不会发射任何荧光信号。从而保证与PCR产物的增加完全同步。
SYBR Green I染料能够选择性地结合于dsDNA双螺旋的小沟区域，并发出绿色荧光。在游离状态下，这种染料的荧光信号微弱，但一旦与双链DNA结合，其荧光强度会显著增强。正是基于这一特性，我们可以在PCR反应体系中加入过量的SYBR Green I染料，利用其与DNA双链的特异性结合来发射荧光信号。通过检测这些荧光信号，我们可以...