可以有效提高定量PCR的效率,当荧光染料 SYBR Green I 与 DNA 双螺旋结合时,在溶液中,未结合的染料显示出较小的荧光,而当它与DNA 结合后荧光就会急剧增强。由于 SYBR Green I 染料较为稳定(在 30 次扩增循环中仅损失 6% 的活性)并且 LightCycler 仪器的滤光片组与激发和发射波长相匹配,所以它常常被用于...
SYBR Green I,EG是电泳级低毒高灵敏的花青类DNA荧光染料,适用于各种核酸电泳分析。产品特点:1.低毒安全,其致突变性低于EB 数倍甚至数十倍。2. 髙灵敏,SYBR Green I与dsDNA 结合,荧光信号会增强800-1000倍,至少可检出 20 pg DNA,灵敏度高于EB染色法10-25倍。3.适用范围广,可适用于多种电泳分析,包括琼脂糖...
对于使用SYBR Green I染色后的凝胶,如果需要进行Southern blots,建议在预杂化和杂化溶液中加入0.1%至0.3%的SDS,这有助于提高实验效果。在观察荧光时,双链DNA结合的SYBR Green I会显示出绿色荧光,而单链DNA则会呈现为橘黄色。这种特性有助于区分DNA的链状态。SYBR Green I对材料的选择性较强,它...
由于Sybr Green I的荧光发射集中在500nm附近,因此把它用作qPCR的检测染料是一个不错的选择。另外,它的特性还表明它可以作为双链DNA特异性结合的染料,包括基因检测、筛选特异性cDNA文库等。 Sybr Green I的定量检测原理是:在Sybr Green I染料的体系中,双链DNA和Sybr Green I结合之后,会使染料发出一种特殊的荧光...
前者主要是利用荧光染料(如SYBR Green I)与双链DNA分子结合发光的特性来指示扩增产物的增加,优点是:无需另外设计荧光探针,无需特别优化条件,简便易行,成本较低,能适用于任何一款定量PCR仪,缺点是专一性不如探针法;而后者则利用荧光标记的特异性探针或者引物来识别模版,优点是特异性更高,适用于扩增序列专一检测(见...
本制品是一种用于实时荧光定量PCR,即qPCR或real-time PCR的高品质预混液,主要用于cDNA和基因组DNA等的特异性超高灵敏度定量检测。 本制品包含了ByFast Taq DNA Polymerase、PCR Buffer、dNTPs、SYBR Green I荧光染料、稳定剂和镁离子等所有的通用组分,使操作更简单、使用更便捷。用户只需自备引物、样品DNA和去离子...
1、荧光染料法(SYBR Green):SYBR Green Ⅰ是荧光定量PCR中最常用的荧光染料,它能与所有的双链DNA...
SYBR Green I法是进行定量qpcr实验的常用方法,本文介绍了SYBR Green I法的原理、优缺点,以及进行定量qPCR的常见问题和解决方法。 一.SYBR Green I法原理 1.Sybr Green I是一种结合于小沟中的双链DNA结合染料,在PCR反应体系中,Sybr荧光染料特异性地掺入DNA双链与双链DNA结合后,发射荧光信号,而不掺入双链中的...
SYBR Green I方法是目前最为常见的荧光染料,其作用原理为:SYBR Green I是一种只与双链DNA小沟结合的染料,并不与单链DNA链结合,而且在游离状态不发出荧光,只有掺入DNA双链中才可以发光,因此,在PCR体系中,随着特异性PCR产物的指数扩增,每个循环的延伸阶段,染料掺入双链DNA中,其荧光信号强度与PCR产物的数量呈正相...