定量PCR中的染料通常是SYBR Green I,但它也并非完美。SYBR Green I对PCR有抑制作用,在实验中的使用浓度很低,且与富含GC的序列优先结合。因此,后续的熔解分析只能判断PCR扩增产物中是否存在引物二聚体及其他非特异性的扩增,而不适合HRM分析。 于是,研究人员也在不断尝试新品,来替代SYBR Green I。南澳大利亚大学药学...
染料法原理染料法一般使用的是SYBR Green I染料,这是一种可以与双链DNA小沟结合的荧光染料,其不会与单链DNA结合,且在游离状态下几乎无荧光,只有与双链DNA结合才会发出荧光,因此将PCR扩增产生的双链DNA数量与荧光强度直接关联,产生实时监测的效果。SYBR Green染料法优点☑ 通用性好,适合进行大多数类型的定量反应,...