SYBR Green I 适用于各种电泳分析,使用简单,灵敏度高(在497 nm的透射光下,灵敏度高于EB 染色法10～25 倍),可以检出20pg 的DNA。SYBR Green I 核酸染料与核酸结合后的更大吸收峰在蓝绿可见光区,适用于使用可见光系列仪器对染色结果进行观察。同时,其在紫外区300nm～380nm 也有一个吸收峰,使得其染色结果也...
根据实验设计和PCR分析目标,可以选择常见的PCR模式,如热启动PCR、实时定量PCR等。 5.实时监测和检测:实时PCR过程中,SYBR Green I染料会结合在增长的DNA链上,这会导致SYBR Green I染料的荧光信号增强。PCR仪会监测和记录SYBR Green I染料的荧光信号的变化,并将其转换为PCR产物的数量。 6.数据分析:根据实时PCR仪记...
因为SYBR Green I染料具有最强的敏感性，因此可以用于电泳后染色。SYBR GreenI不会干扰Taq DNA聚合酶、反转录酶、限制性核酸内切核酸酶、噬菌体T4DNA连接酶活性，并且在Ames实验中显示出弱于溴化乙锭的致诱变性。因为SYBRGreenI能够被玻璃表面强烈吸收，所以染色溶液应该在塑料容器中配制。像其他SYBR染料-样，SYBR Gree...
二、SybrGreen荧光染料在实验中的应用 1. DNA凝胶电泳实验 SybrGreen常用于DNA凝胶电泳实验中,通过与DNA结合并发出荧光信号,可以快速、准确地检测DNA的存在及其迁移距离。只需将SybrGreen加入DNA样品中,然后进行凝胶电泳,便可通过观察荧光信号来判断DNA的大小和纯度。 2. 实时荧光定量PCR 实时荧光定量PCR是一种用于测量...
SYBR Green I方法是目前最为常见的荧光染料,其作用原理为:SYBR Green I是一种只与双链DNA小沟结合的染料,并不与单链DNA链结合,而且在游离状态不发出荧光,只有掺入DNA双链中才可以发光,因此,在PCR体系中,随着特异性PCR产物的指数扩增,每个循环的延伸阶段,染料掺入双链DNA中,其荧光信号强度与PCR产物的数量呈正相...
SYBR GreenⅠ用于琼脂糖电泳检测DNA后，可直接将DNA转移至膜上，进行后续核酸印迹杂交反应。此外，SYBR GreenⅠ与DNA的结合对多种常用的限制性内切酶活性无抑制作用，可直接进行消化或连接。使用说明： 该产品使用方法同EB.点染法：用于琼脂糖凝胶电泳：取原液1ul加入TE缓冲液或灭菌双蒸水1ml，再加入6×DNA ...
SYBR Green I,一种灵敏度非常高的dsDNA荧光染料,常用于核酸琼脂糖凝胶/聚丙烯酰胺凝胶电泳。SYBR Green I染料的最大激发波长为497 nm,但是在～290 nm和～380 nm处有二级激发峰。与DNA结合的SYBR Green I染料的荧光发射集中在520 nm。因此,该染料可适用于多种凝胶检测仪。
SYBR Green I (SG) 作为嵌入型染料广泛用于实时 PCR 应用，并以未公开的浓度包含在许多市售试剂盒中。SG 与双链DNA 的结合是非特异性的，需要额外的测试，例如 DNA 熔解曲线分析，以确认特异性扩增子的产生。熔解曲线分析的使用消除了琼脂糖凝胶电泳的必要性，因为特定扩增子的熔解温度 (Tm)类似于电泳条带的...