如何用SV40大T抗原永生大鼠腹侧间脑NPCs 今天推荐的是由汉诺威医学院神经解剖研究所在2010年2月23日发表于Cell and Tissue Research(2021IF:3.5999,JCRQ1)的一篇文章,通讯作者是Claudia Grothe教授,研究表明用SV40大T抗原永生化的大鼠腹侧间脑神经元祖细胞的特征和分化潜能。 研究背景 神经元祖细胞(NPC)在再生医学中具...
SV40 T抗原作为DNA病毒的重要成分,通过以下方式实现细胞的永生化: 稳定端粒长度:维持端粒的长度稳定,防止端粒缩短导致细胞衰老。 抑制细胞衰老:通过抑制p53的活性,延缓细胞衰老过程。 增强DNA修复能力:改善细胞对DNA损伤的修复能力,减少致命性基因突变的累积。 结论 综上所述,SV40 T抗原通过多种机制影响细胞的生长和生...
Simian Virus 40 Large T Antigen, SV40T抗原慢病毒(可用于构建永生化细胞) SV40(simian virus 40)是从猿猴肾细胞病毒中分离出来的,SV40病毒的细胞转化特性主要与早期蛋白T抗原有关。SV40病毒基因组早期基因编码两种肿瘤抗原(tumor antigen,T抗原),其分子量分别为94000(大T抗原)和17000(小T抗原).T抗原的作用是:...
SV40病毒基因组早期基因编码两种肿瘤抗原(tumor antigen,T抗原),洋其分子量分别为94000(大T抗原)和17000(小热功T抗原).T抗原有以下的作用:①大T抗原为细席均深副孙胞转化的启动所必需;②转化细胞表型的维持必需要有大T抗原的连续表达;③小T抗原对于细胞的转化不是必需的,但可起加强作用.SV40病毒引起的无转化是...
SV40病毒引起的转化是一个复杂的过程,目前尚难将转化细胞的生物学特性改变与SV40大T抗原的特异生化性质联系起来.一般有两种假说进行解释①SV40病毒编码的转化蛋白作用于细胞的质膜改变了细胞生长必需的功能;②转化蛋白作用于细胞核调节DNA复制和基因表达的部分.现知SV40的大T抗原大部存在于转化细胞的核内,与核质、染色...
第三军医大学硕士学位论文SV40T抗原基因诱导可逆性永生化黑素细胞的生物学特征评价摘要正常细胞在体外培养时生命期是有限的,细胞增殖一段时间后会出现群体生长缓慢,有丝分裂停滞,进而衰老死亡,这种现象叫做复制衰亡( repl i cati ve senescence)。细胞的这种生物学现象导致一些体外培养的细胞因生长增殖能力衰竭、数量不...
目的建立永生化大鼠前软骨干细胞(PSCs)株,为研究前软骨干细胞的分化机制及临床应用奠定基础.方法用L ipofectam ineTM2000介导基因转染,将含有SV40T抗原基因的真核表达载体pCMVSV40T/PUR导入经免疫磁珠分选出的原代PSCs进行稳定表达,用嘌呤霉素筛选出阳性克隆并扩大培养,观察细胞形态及生长状况,绘制细胞生长曲线,用免疫...
SV40T抗原引起细胞转化是一个复杂的过程,目前仍不完全清楚其机制.一些研究发现SV40T抗原能与肿瘤抑制因子pRb和p53相互作用,影响它们调控正常细胞生长周期和细胞凋亡的功能,也有研究认为SV40T抗原基因可通过调节端粒酶的活性使细胞的端粒长度得到维持.细胞的永生化被认为可能是向肿瘤细胞转化的必经阶段,因其安全性受到质疑...
目的建立猿肾病毒40大T抗原(SV40Tag)永生化尿源性干细胞,为组织工程学及再生医学提供稳定的细胞来源。 方法利用脂质体(Lipofectamine2000)介导将含SV40Tag基因质粒pMPH-FRT-SV40T及转座酶质粒(transposase)共转染至临床分离的尿源性干细胞中。潮霉素(Hygromycin)筛选后阳性细胞克隆并连续传代,观察细胞形态学以及增殖情况...
1.一种构建永生化细胞株的方法,其特征在于,包括以下步骤: 1)构建SV-40T抗原慢病毒表达载体: 以含SV40 T抗原cDNA序列的SV40 tsA58质粒为模板,根据NCBI的SV40完整基因组(NC_001669.1)设计特定的质粒构建引物,高保真PCR获取SV40T抗原全长cDNA,对扩增得到PCR产物进行纯化; 将PCR产物TOPO克隆进入pENTR TM TOPO载体,获得...