suntag技术原理suntag技术原理 SunTag技术原理主要基于单链可变区片段抗体(Single-chain variable fragment,scFv)的应用。这种技术将scFv的轻链和重链的表位结合区域融合形成一个单独的多肽,这种多肽可以以溶解的形式在细胞内表达,而不同于一般的抗体在细胞中不能正确地折叠。 此外,SunTag实质上是一套分子挂钩,能够将多个...
基于suntag系统的先导编辑器 先导编辑是一种不需要依赖DNA模板从而在特定DNA切口处引入特定突变的编辑技术,这需要一种逆转录酶RT来辅助实现突变。基于suntag系统的先导编辑器Suntag-PE系统中,研究人员将GCN4与Cas9的N端和C端分别融合表达,RT酶则融合scFv。这样做的好处是可以将RT酶和Cas9分开,并且没有显著降低编辑效率...
在实验过程中,作者发现Suntag位于nCas9的N端时,可以实现最好的编辑效果。而dCas9表现则不尽人意。最终作者选择将10个Suntag融合到nCas9(D10A)的N端或C端,并将APOBEC融合于抗体scFv的C端,从而得到BE-Plus。相较于传统的碱基技术BE3,BE-plus能实现更高的编辑效率和编辑窗口,从而提高了基因组靶向范围。 图2. ...
【Cell 新技术 | SunTag之后又来MoonTag,点亮单分子mRNA翻译过程】对于Ron Vale这个名字,想必大家已有所耳闻,他就是那个“1985年26岁时在一年内发表5篇Cell,其中4篇是第一作者”的超级大牛。在2014年,Ron实验室在Cell上再次发文为大家带来一种新颖的蛋白质荧光标记系统,能够显著增强基因表达和荧光成像的信号,该...
图1 SunTag系统将蛋白信号放大 该技术的研发者Marvin Eric Tanenbaum离开Ron Vale实验室后回到荷兰乌得勒支大学医学中心开始了独立研究,于近日在Cell发文Multi-color Single-Molecule Imaging Uncovers Extensive Heterogeneity in mRNA Decoding,发现...
图1 SunTag系统将蛋白信号放大 该技术的研发者Marvin Eric Tanenbaum离开Ron Vale实验室后回到荷兰乌得勒支大学医学中心开始了独立研究,于近日在Cell发文Multi-color Single-Molecule Imaging Uncovers Extensive Heterogeneity in mRNA Decoding,发现了能够以多种颜色标记单个mRNA的新技术MoonTag,为更复杂的mRNA翻译过程以及翻...
美国加州大学开发了SunTag技术 [内容提要]:记者获悉到由美国加州大学Ronald Vale实验室的博士后Marvin Tanenbaum开发了一项SunTag新技术。他在目的蛋白中加入多个拷贝(多达24个)的多肽表位,将这个蛋白与能识别该表位的荧光抗体共表达。 近日,记者获悉到由美国加州大学Ronald Vale实验室的博士后Marvin Tanenbaum开发了一项...