引物自身及引物之间不应存在互补序列。连续互补的碱基应该要少于4 个。引物 应使其△G 值不要太高,△G 值越大,则双链越稳定。2/4 引物长度和GC 含量要适中。引物长度大概为18~28 bp,但不应大于38 bp,引物过短会影响到扩增的特异性,太长的话其延伸温度将会大于74 ℃,不利Taq 酶的催化...