SSCP是单链构象多态性(single-strand conformation polymorphism,SSCP)的缩写。其原理是当双链DNA变性为两条单链后,各自会在中性条件下形成各自特定的空间构象,因而在电泳时将在不同的位置上出现各自电泳条带。如果DNA序列发生变化,甚至只有一个碱基变化,空间构象也有可能发生变化,电泳条带也随之变化。也就是说在相同...
PCR-SSCP技术是一种分子生物学分析方法，由日本Orita等于1989年创建，是筛查突变的新技术。这种技术结合了PCR（聚合酶链式反应）和SSCP（单链构象多态性）的原理。PCR技术是一种在引物参与下，由酶催化特定克隆或基因组DNA序列进行的体外扩增反应。它具有灵敏度高、简便、快速的特点，且对标本的纯度要求低。而SSCP技术...
SSCP是一种简便快速的检测DNA或cDNA突变的技术。其技术原理和过程是:将PCR扩增到的待测DNA或cDNA片段变性,成为单链DNA,在一定条件下,通过聚丙烯酰胺凝胶电泳将单链DNA变性。由于单链DNA的空间构象与分子内碱基组成密切相关,一个碱基的差异即可形成不同的构象医学教|育网|收集整理,不同构象的DNA在聚丙烯酰胺凝胶电泳...
SSCP是单链DNA构象多态性，RFLP是限制性DNA长度多态性，都可以用来检测某位置的插入缺失、点突变。操作：先设计目的片段DNA引物，PCR扩增，获得PCR产物。1、SSCP是将PCR产物变性，然后跑电泳。由于DNA的插入缺失、点突变的原因，单链DNA会形成不同的二级结构，电泳的迁移速率差别就会不同。2、RFLP是将PCR...
称该方法为单链构象多态性(SingleStrand Conformation PolymorPhism,SSCP)分析.在随后的研究中,又将SSCP用于检查扩增产物的基因突变,从而建立了SSCP技术,进一步提高了检测突变方法的简便性和灵敏性.其基本过程是:①扩增靶DNA;②将特异的扩增产物变性,而后快速复性,使之成为具有一定空间结构的单链DNA分子;③将适量的单链...
聚合酶链式反应一单链构象多态性(PCR-SSCP)分析技术为分子生物学的研究提供了一个简单、快捷、经济的手段。在该技术中，首先利用PCR技术扩增目的DNA，扩增时利用引物标记法或碱基掺入法使扩增的产物带有标记，如荧光物质、同位素、生物素等。然后将扩增产物变性并进行非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳，区别扩增产物...
Hayashi认为SSCP分析对于小于400bp的PCR产物最有效。 4在植物病理学方面的应用 4.1 PCR-SSCP技术在植物病毒研究上的应用 PCR-SSCP技术除了在菌根真菌、柳锈菌以及少量的植物病毒的研究上有应用外,在植物病理学上的应用还较少。 4.1.1分子变异的研究PCR-SSCP技术对于大样品量的植物病毒分离物,尤其是血清学技术难以...
由此可见,PCR-SSCP分析技术是一种DNA单链凝胶电泳技术,它根据形成不同构象的等长DNA单链在中性聚丙烯酰胺凝胶中的电泳迁移率变化来检测基因变异。该技术已被广泛用于癌基因和抗癌基因变异的检测、遗传病的致病基因分析以及基因诊断、基因制图等领域。 为了高灵敏特异性地显示SSCP分析结果,现已发展多种PCR-SSCP技术,各...
PCR产物的SSCP-PAGE分析(HLA-DRB) PCR基本原理及相关知识 ? 概念聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)是一种体外扩增特异DNA片断的技术,能在短时间内获得数百万个特异 DNA序列的拷贝。 ? PCR技术最早由美国 Cetus 公司 人类遗传研究室Kary Mullis及同事于1985年发现并研制成功的。 ? Kary Mullis因发明了...
1992年,日本学者Hoshino等对SSCP分析法作了大胆改进,用敏感的银染法直接对电泳后的凝胶进行染色,从而增强了安全性,使得该方法简便、快捷并且无须探针和酶,被广泛使用。至此,PCR-SSCP法确立。由于该方法有以上优点,因此在生物学领域得到了广泛研究和应用[5]。 PCR-SSCP技术是PCR技术和SSCP技术的结合。该技术是一种...