流式细胞仪中,FSC(前向散射)和SSC(侧向散射)是用于分析细胞物理特性的核心参数。FSC反映细胞大小,激光束穿过细胞时,前向散射光强度与细胞直径正相关;SSC体现细胞内部复杂度(如颗粒度、细胞器数量),由细胞折射或散射至侧向的光信号捕获。二者结合可区分不同细胞亚群,广泛应用于免疫分型、细胞活性评估等场景。 一、...
流式细胞术(Flow Cytometry,FCM),其核心研究对象是“流动的细胞”,但这一技术同样适用于广义的“生物微粒”,如细胞、细菌、微球以及小型模式生物等。因此,FCM本质上是一种对上述生物微粒进行快速定量分析和分选的技术,广泛应用于医科研和临床实践领域。在深入探讨FCM时,我们首先需要理解其基础概念之一——流式...
FlowJo 是一款非常强大的工具,用于免疫流式细胞仪(Flow Cytometry)数据分析。它允许用户自由调整 x 轴和 y 轴的成分,从而高效地分析特定细胞的数量。以下是几个经典的门控策略: FSC vs SSC:用于识别淋巴细胞。通过这个策略,你可以轻松地找出淋巴细胞的群体。 SSC H vs SSC A:这个步骤非常重要,用于圈出单个细胞。
FSC和SSC是流式中两个非常基本的参数,FSC的值能代表细胞的大小,细胞的体积越大,其FSC就越大。SSC则代表细胞的颗粒度,细胞内细胞器和颗粒度越大,则SSC越大。分析外周血细胞时,就可以利用FSC和SSC的特性把细胞分为淋巴细胞、单核细胞和粒细胞(左图)。 右图中可以看到...
流式细胞术(Flow cytometry)是20世纪60年代后期开始发展的利用流式细胞仪快速定量分析的物理化学特征以及这些物理化学特征精确分选细胞的新技术,主要包括流式分析和流式分选两个部分。 流式细胞仪通过激光照射液流内细胞后的散射光信号和...
流式细胞术(Flow Cytometry,FCM)是一种对液流中排成单列的细胞或其它生物微粒(如微球、细菌、小型模式生物等)逐个进行快速定量分析和分选的技术,被广泛的运用于从基础研究到临床实践的各个方面,涵盖了细胞生物学、免疫学、血液学、肿瘤学、药理学、遗传学及临床检验等领域,在各学科中发挥着重要的作用。 如上图所...
上面的散点图显示了混合细胞群的FSC/SSC分布(a)。通过对ViaFluor®405标记的NK细胞和CAM标记的K562...
Abbreviations FC: Flow cytometry SSC: Wide-angle light scattering intensity or side scattering signal SCA: Single-cell analysis FSC: Scattering in forward direction RI: Refractive index References Fritzsch FSO, Dusny C, Frick O, Schmid A. <ArticleTitle Language=“En”>Single-Cell analysis...
SSC-H 与 SSC-W;FSC-H 与 FSC-W 由于双粘连体的脉冲宽度大于单个细胞脉冲的宽度,基本达到两倍的关系,所以我们也可以使用高度(H)与宽度(W)来排除粘连细胞。因为H独立于W,这种方法不会受到面积的影响,也是非常值得推荐的。需要注意的是,如果检测样本中各种细胞的大小差异较大,此种分析方式可能不太适用。如下图...
Flow cytometryCell surface markerThough the guinea pig has been an extremely useful animal model for a variety of diseases, the tools necessary to undertake a full-scale immunological analysis of the guinea pig have been lacking. For instance, traditional two-parameter forward/side scatter (FSC/...