共同作者Magnus-Carsten Huppertz和Jonas Wilhelm以及同事们开发了Split-HaloTag——在特定细胞活动和荧光底物的存在下会被标记的蛋白质。荧光底物和瞬时细胞活动的结合，比如蛋白质间的相互作用或细胞内Ca2+水平的增加，可用于有理设计记录器，以捕捉稍后分析的瞬时事件。荧光底物的加入和洗脱确定了记录时段。这些步骤之前...
鉴于Ca2+信号的广泛使用和HaloTag标记在许多模型系统中的成功应用,Caprola有望在生物学的不同领域中得到应用。 根据作者的说法,通过利用其他基于蛋白的荧光生物传感器的设计原则,应该可以设计用于其他细胞活动的记录器。这是因为生物记录的设计原则将细胞活动与split-HaloTag的两个组分的增加亲近联系起来。split-HaloTag系...
and structured illumination microscopy to provide examples of sophisticated imaging.Split-GFPand Split-HaloTag can complement one another,as Split-HaloTag represents an alternative option and an addition to the large toolbox of in vivo methods.Therefore,this promising new Split-HaloTag imaging assay ...
第一,作者们通过构建RNA-SPLIT成像的技术揭开了Xist分子在Xist RNA扩展过程中存在扩展阶段以及稳定阶段两种状态,这两种状态表明Xist RNA存在合成与降解的反馈机制。第二,作者们通过多次进行HaloTag的处理,发现新合成与已合成的Xist RNA之间存在空间上的共定位,也就是偶联存在的关系,对Xist RNA的行为特点进行了进一步的...
基于HaloTag改进的工具层出不穷,其中split-HaloTag系统打开了一扇通向新型化学标记方法的大门,它可以将细胞生理学与特定生物学表型联系起来。这一创新系统极具发展潜力,亟需进一步优化以拓展其在生物学研究领域的广泛应用。 导读 由于光学显微镜分辨率的限制,直接观测细胞中的蛋白质活动轨迹一直面临挑战。split-HaloTag系...
他们利用BglG/Bgl茎环系统来标记特定的RNA和一种BglG-HaloTag融合蛋白。在活细胞(用多西环素诱导的Xist RNA进行改造的小鼠XX胚胎干细胞)中用不同的荧光HaloTag配体连续脉冲,使得他们能够使用超分辨率三维结构照明显微镜(3D-SIM)对单一Xist RNA分子进行时间分辨率成像。相关研究结果近期发表在Science期刊上,论文标题为“...
Using this approach, we have engineered and optimized the tag-assisted split HaloTag complementation system (TA-splitHalo) and demonstrated its versatile applications in improving the efficiency of knock-in cell enrichment, detection of protein-protein interaction, and isolation of biallelic gene edited...
Therefore, we established the new Split-HaloTag imaging assay to enable sophisticated fluorescence imaging of protein-protein interactions. This is demonstrated using an well-characterised interaction as an example for protein-protein interaction at cellular structures: the molybdenum cofactor biosynthesis ...
Using this approach, we have engineered and optimized the tag-assisted split HaloTag complementation system (TA-splitHalo) and demonstrated its versatile applications in improving the efficiency of knock-in cell enrichment, detection of protein-protein interaction, and isolation of biallelic gene edited...
基于HaloTag改进的工具层出不穷,其中split-HaloTag系统打开了一扇通向新型化学标记方法的大门,它可以将细胞生理学与特定生物学表型联系起来。这一创新系统极具发展潜力,亟需进一步优化以拓展其在生物学研究领域的广泛应用。 导读 由于光学显微镜分辨率的限制,直接观测细胞中的蛋白质活动轨迹一直面临挑战。split-HaloTag系...