实验二链霉亲和素-过氧化物酶法 （SP法）DepartmentofHistologyandEmbryology 一、实验目的 1掌握免疫组化染色的原理及步骤2了解免疫组化实验的设计及问题解决方法 免疫组织化学原理 利用抗原（antigen,Ag），抗体（antibody）特异结合的原理，用已知抗体检测未知抗原的一种方法。二、SP法基本原理 （streptavidin-perosida...
病情分析:免疫组化SP法是一种用于检测组织样本中特定抗原的实验技术,具有较高的灵敏度和特异性。 1.基础原理:免疫组化(IHC)是通过抗体与抗原之间的特异性结合来进行检测的一种方法。SP法指的是Streptavidin-Biotin-Peroxidase复合物法,它利用生物素与链霉亲和素之间高度特异性的结合,提高了检测信号的强度。 2.步骤...
链霉菌亲和素-过氧化物酶连结法 (Streptavidin-PeroxidaseConjugatedMethod,简称S-P法)检测胃癌组织CK／Vimentin的蛋白表达 武汉大学病理教研室 资料仅供参考,不当之处，请联系改正。S-P法原理示意图 链酶亲和素生物素化二抗 过氧化物酶生物素 待测抗原 特异性一抗 武汉大学病理教研室 资料仅供参考,不当之处，请...
免疫组化SP法是专为免疫组化和其他免疫检测而设计的,用以显示组织和细胞中抗原分布。即链霉菌抗生物素蛋白~过氧化物酶连结法。 采用生物素标记的第二抗体与链霉菌抗生物素蛋白链接的碱性磷酸酶及底物色素混合液来测定细胞或组织中的抗原。 免疫组化SP大约可形成一百万个左右的过氧化物酶和五十个左右的链霉亲和素...
亲和素是一个碱性蛋白质(IP=10),经改造后可以转变为中性蛋白质。链霉亲和素等电点接近中性,IP=6.0~6.5,对组织和细胞的非特异吸附很低,基于链霉亲和素的免疫组化方法背景很低。根据研究,SP大约可形成一百万个左右的过氧化物酶和五十个左右的链霉亲和素所形成的复合物。大量的酶将保证SP具有很高的敏感性。SP...
1、ABC 法: ABC 代表的是亲和素一生物素一过氧化物酶复合物。 利用抗生物素分 别 连接生物素标记的第二抗和生物素标记的酶。 但是此法注意内源性生物素活性的 消除,以减少非特异性的染色。SP 法:是采用生物素标记的第二抗体与链霉菌抗生物素蛋白连接的碱性磷酸酶 及底物色素混合液来测定细胞或组织中的抗原...
sp法是:一抗+生物素化二抗+HRP标记的链霉卵白素(HRP标记的亲和素) 酶标亲和素-生物素技术(labelled avidin-biotin technique,简称LAB法)。即用辣根过氧化物酶直接标记avidin,用biotin标记2抗。 关键步骤为3步: Ag +Ab1 +(Ab2-B)+A★ (A★为HRP标记的卵白素)A★与2抗的生物素结合,avidin起桥联作用。
实验名称链霉菌亲和素-过氧化物酶连结法(Strep 2、tavidin-Peroxidase Conjugated Method, 简称S-P法)检测胃癌组织CKVimentin的蛋白表达S-P法原理示意图过氧化物酶链酶亲和素生物素生物素化二抗特异性一抗待测抗原免疫组织化学基本实验流程组织、细胞标本 抗原修复 阻断内源性过氧化物酶 正常血清封闭 滴加特异性...
13、滴加SP(链霉亲和素-过氧化物酶),室温或37℃孵育30min-1h 14、PBS冲洗2-3次,每次5min 15、显色:DAB显色5-10min,在显微镜下掌握染色程度(胞浆呈棕色者判定为阳性细胞) (显色剂的配置:在1ml水中加1滴显色剂A,摇匀,然后加1滴显色剂B,摇匀,再加1滴显色剂C,摇匀) (A:DAB B:H2O2C:磷酸缓冲液...
SP(链霉菌亲和素-过氧化物酶联法)目的:为了提高T淋巴细胞的检测,评价测定TL-亚群的两种方法——APAAP和SP法.方法:以APAAP和SP法分别对本院30例病人做了TL-亚群的观察分析.将两法的测定结果进行了配对t检验,相关分析及显著性检验.结果:CD_3~+;t=5.8,P0.05,相关分析显著性检验:三者P<0.01.结论:表明两种...