Northern blot是1977年由James Alwine、David Kemp和George Stark发明的将RNA分子从胶上转印到膜上的方法，该方法可通过检测RNA的表达水平来检测基因表达，也称为RNA印迹杂交。两者实验流程大致相同，DNA（或RNA）提取进行琼脂糖凝胶电泳→转膜→标记的探针与膜杂交→洗去未结合的探针→放射显影（图1）。接下来将详细介...
待转完之后，小心取下盐桥上的所有装置，用镊子夹起膜，放在一张较大的滤纸上（可以包住膜的），放在一纸板内，置于80℃真空烘膜2h。待烘完膜之后便可以置于4度冰箱中冷藏或进行Southern blot。5. 杂交加探针 将Southern杂交液提前在65℃温浴，将膜放入一端封口的杂交袋（长约30cm）中，膜靠近封口的一端。 ...
22cm×15cm 瓷盘 操作方法 1. 在琼脂糖凝胶上电泳分离 DNA。取出凝胶，切去边缘多于部分，EB 染色，在紫外灯下照相（放一标尺，可从像片中读出 DNA 迁移的距离）。2. 将凝胶置于 200mL 变性液中，浸泡 45 分钟，并温和地不断振荡，使凝胶上的 ds-DNA 转变为 ss-DNA，然后用重蒸水冲洗凝胶几次。3. 用...
Western blot(蛋白质印迹)主要用于检测特定蛋白质。其原理是将蛋白质通过电泳分离后转移到膜上,然后使用针对目标蛋白的抗体作为探针进行特异性结合检测。因此,第一个空应填“抗体”。 Southern blot(DNA印迹)用于检测特定DNA序列,Northern blot(RNA印迹)用于检测特定RNA。这两者均基于核酸分子杂交原理:探针需与目标序列...
南方点杂交（Southern blot）是一种用于分析DNA的技术，它能帮助科学家识别和分析特定的DNA片段。这一过程通常涉及DNA片段的提取、限制性内切酶消化、凝胶电泳分离以及与探针的杂交。探针通常是标记的DNA或RNA片段，专门设计用于与目标DNA序列结合。相比之下，北方点杂交（Northern blot）专门用于分析RNA。它的...
Southern blot技术涵盖核酶降解DNA、电泳分离、转移至膜及与标记探针杂交，随后洗涤、显影实现DNA检测的关键步骤。▣ 技术步骤 详细步骤如下：首先，DNA样品经核酸限制性内切酶降解后，通过琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶电泳进行分离。电泳完成后，凝胶需浸泡在碱液（如NaOH）中，以使DNA发生变性。变性后的DNA随后被转移到...
Southern Blot(DNA印迹)实验详解 1. 实验原理: DNA印迹(Southern Blot)是一种用于检测特定DNA序列的技术,通过将基因组DNA或质粒DNA进行酶切、琼脂糖凝胶电泳分离后,将分离的DNA片段转移到固相膜(如硝酸纤维素膜或PVDF膜)上,再通过与特异性探针杂交检测目标DNA的存在和大小。此技术最初由Edward Southern于1975年发明...
Southern blot操作注意事项：确保基因组DNA质量：OD260/280应在1.8～2.0之间，OD260/230应大于2.0。DNA浓度需达到每微升至少100 ng。通过琼脂糖凝胶电泳检测DNA，确保无蛋白质、RNA污染，无降解现象，且电泳带清晰。高质量探针的制备：探针长度应控制在300～1000 bp之间，以避免非特异性结合。探针设计...
14.(10分)Southern Blot 技术是一种分析DNA分子的常见技术,通过电泳分离不同长度的DNA分子,并通过放射性探针与分离的DNA分子形成杂交带,通过放射性自显影来确定特定DNA分子的相对含量或存在情况;FISH技术又称荧光原位杂交技术,通过设计带有荧光标记的探针来确定特定基因在染色体上的分布情况。 请回答下列问题:(1)Southe...