Southern Blot的核心原理是将DNA片段从琼脂糖凝胶电泳中转移到硝酸纤维素膜或尼龙膜上,然后使用标记的DNA探针与膜上的目标DNA序列进行杂交。通过杂交信号的检测,可以识别样本中是否存在特定的DNA序列,并分析其性质。 步骤: 1.DNA酶切: 选择合适的限制性内切酶将待分析的DNA样本切割成不同长度的片段。每个限制性内切酶...
Southern blot:Southern印迹。该技术是根据毛细管作用的原理使在电泳凝胶中分离的DNA片段转移并结合在适当滤膜上然后通过同标记的单链DNA或RNA探针的杂交作用检测这些被转移的DNA片段。这种实验方法叫做DNA印迹杂交技术。由于它是由E. Southern于1975年首先设计出来的故又称Southern印迹。 Westem blot:对DNA有Southern印迹法...
Southern blot技术的原理是基于DNA的亲和性杂交和电泳分离。 需要提取待检测的DNA样本,并在实验室条件下将其切割成片段。然后,将这些DNA片段通过电泳分离。电泳是一种利用电场将带电粒子(如DNA片段)分离的技术。通过电泳,DNA片段根据其大小被分离成不同的带状图案。 接下来,将DNA片段转移到固体支持介质上,通常是一...
Southern Blot可以检测样品中的 DNA 及其含量，了解基因的状态, 如是否有点突变、扩增重排等。原理 将待检测的 DNA 分子用/不用限制性内切酶消化后，通过琼脂糖凝胶电泳进行分离，继而将其变性并按其在凝胶中的位置转移到硝酸纤维素薄膜或尼龙膜上，固定后再与同位素或其它标记物标记的 DNA 或 RNA 探针进行反应。...
这两个技术的基本原理是根据核酸同源序列互补的原理,在变性后核酸分子双链打开,复兴后依据碱基互补配对的原理重新形成双链。这样把其中的一条已知序列的核酸链标记上同位素或地高辛就成为探针,可以检测样品中的未知序列。Southern Blot 是用于检测基因组中是否有同源序列的存在,现将DNA通过限制性内切酶没切,电泳分离,...
配置1%转膜胶，加入干净的缓冲液为1×TAE，Loading Buffer 煮过的样本加样，0V，跑胶24-26h；4. 转膜后处理 待转完之后，小心取下盐桥上的所有装置，用镊子夹起膜，放在一张较大的滤纸上（可以包住膜的），放在一纸板内，置于80℃真空烘膜2h。待烘完膜之后便可以置于4度冰箱中冷藏或进行Southern blot。5....
原理:Southern blot:一种检测DNA分子的方法。将DNA片段从琼脂糖凝胶转移到滤膜,结合了DNA分子的滤膜先与特定的预杂交液进行预杂交,然后与标记的核酸探针和滤膜混合。如果滤膜上的DNA分子存在与探针同源的序列,那么探针将与该分子形成杂合双链,从而吸附在滤膜上。在经过一定的洗涤程序将游离的探针分子除去后,通过放射自...
Southern印迹的原理 Southern印迹的原理类似于将生物分子从膜转移到另一膜以进行检测和鉴定的印迹技术。 待分析的 DNA 用限制性内切酶消化,并通过琼脂糖凝胶电泳过程按大小分级。 DNA 链通过碱处理变性,并通过印迹过程转移到尼龙或硝酸纤维素膜上。 膜上的链通过烘烤或紫外线照射固定在表面上。可以通过杂交过程检测膜...