在预实验中设置Blank组和Mock组，以确认转染试剂及阴性对照无毒副作用，且对基因沉默检测指标无显著干扰影响。在预实验中设置FAM-NC组进行转染效率检测，以确定适合的转染试剂及转染条件。| 细胞实验建议 (1) 为了降低细胞密度、试剂用量，转染效率等因素导致的孔间差异，保证实验的可靠性和可重复性，我们建议转染实验...
后来人们发现小于30bp的dsRNA即可有效引起基因沉默,并且不会产生非特异抑制现象,进一步研究表明抑制作用最强的是长21bp、3′端有两个碱基突出的siRNA。 但RNAi技术要求siRNA反义链与靶基因序列之间严格的碱基配对,单个碱基错配就会大大降低沉默效应,而且siRNA还可以造成与其具同源性的其他基因沉默(也叫交叉沉默),所以在...
4、正常实验组应该有①空白组(什么都不加的);②只加转染试剂的组;③NC组;④siRNA组;⑤阳性对照组。理想的结果是①②③组的数据应该相同,或者差别不大。a)如果NC组与空白组比下调超过50%说明NC起作用了,说明NC毒性大。这时应该降低siRNA和NC的用量。降低用量后,下调还是明显,就要换一个NC试一试。b)如果②与...
实验过程中,产品请冰上放置,使用完毕后请于-20℃~ -80℃小心保存。 售价: ¥500.00 原价:¥780.00 服务: ･ 30天无忧售后･专业技术辅导实验･专人专送免邮･ 奥源自营 质粒规格 5nmol 产品详情 产品参数 siRNA NC空白对照 下载说明书
NC,NG,AC等—基因组类型; NR,XR—非编码转录本(NR表示认证的,XR表示预测的); AK、AF等命名—看注释,大部分为文章的作者提交的序列。 Genbank ID对应的横线表示前体RNA 竖形方块表示外显子 浅色方块表示UTR 深色方块表示编码区 每个Genbank...
M-CSF,RANKL和NC-CaP-LNC或 NC-CaP-rHDL处理小鼠骨髓来源巨噬细胞(BMDM)7天。(a,b)通过抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色证实经纳米颗粒处理后破骨细胞形成显著减少。(c,d)破骨细胞用DAPI(蓝色)染核,罗丹明-鬼笔环肽(红色)染色F-actin环,...
NC,NG,AC等—基因组类型; NR,XR—非编码转录本(NR表示认证的,XR表示预测的); AK、AF等命名—看注释,大部分为文章的作者提交的序列。 Genbank ID对应的横线表示前体RNA 竖形方块表示外显子 浅色方块表示UTR 深色方块表示编码区 每个Genbank ID共有的方块即为同源区 ...
D.转膜：将电泳后的凝胶转移到PVDF或NC膜上，通常采用湿式转膜法。转膜过程中需要注意操作技巧，以防止过度伸展、断裂或气泡等问题。E.堵孔：将转膜的膜放入5%非脂奶粉的TBST溶液中，使其在室温下缓慢摇晃堵孔1小时。F.一抗孵育：将适当稀释后的一抗（一般为目标蛋白的特异性抗体）加入到堵孔好的转膜膜中，并...
图1. RFect V2转染FAM-NC至原代大鼠主动脉平滑肌细胞,荧光呈点状,略带折光,分散于细胞质内,中间没有荧光的部分为细胞核。 二、基因沉默效率 如上所述,转染阳性率只是一个直观的表象指标,目的是用来初步判断转染试剂能否将siRNA转进细胞,但研究者无法通过该数据来获得准确的siRNA转染结果。想要准确判断siRNA转染结果还...
为了比较Starvio DNA&siRNA和Lipo3000的细胞毒性,我们在原代大鼠主动脉平滑肌细胞中进行了小核酸NC-FAM 转染。结果显示,Starvio DNA&siRNA转染后的细胞死亡率只有5%左右,与空白对照的细胞死亡率几乎一致,这说明Starvio DNA&siRNA的细胞毒性极低,可能与其成分主要为可降解生物材料有关。使用Lipo3000进行转染,细胞死亡率...