首先,你买回来的siRNA通常是冻干粉末,每管有2.5nmol。你需要加125ul的双蒸水(ddH2O)来配置成20uM的储备液。这个步骤很简单,但一定要小心,别让粉末弄到手上哦!配置好的储备液可以放在-20℃保存,方便以后使用。 细胞种板 🧪 接下来就是细胞种板了。一般来说,24孔板每孔种1*10^5个细胞,用400ul的无双抗...
siRNA浓度和用量的一般换算:1OD≈33ug≈2.5nmol 1OD加125ul的水,得到20uM的浓度。1ul就是20pmol,在1ml细胞培养液中加1ul(20pmol),那终浓度就是20pmol/ml=20nM。加2ul就是40nM,以此类推。如果按ug计算,1OD加125ug水溶解后,质量浓度为33ug/125ul=0.264ug/ul。 siRNA影响基因阻断水平 (Gene Knockdown L...
混合液1:50 uL opti-MEM + 1.5 uL的转染试剂(Lipofectamine RNAiMAX) 混合液2:50 uL opti-MEM + 1.25 uL的siRNA(siRNA储液浓度为20 uM) 将混合液2加入到混合液1中,室温放置5 min; 将混合液加入到24孔板中; 【注意设置阳性对照(GAPDH的siRNA)和阴性对照,混合液1和2可以根据需要的量等比例放大】 (4) 6...
混合液2：50 uL opti-MEM + 1.25 uL的siRNA(siRNA储液浓度为20 uM)将混合液2加入到混合液1中，...
1.2 需要浓度20uM的样品,如何计算重悬siRNA缓冲液的量?你购买了1OD的siRNA,想溶解为20uM 的样品,应该使用125ul附送的DEPC水去重悬1OD的siRNA,溶解后为20uM的样品。 1.3 贮存和稳定性:-20℃,避光保存,冻干粉或液体。液体(贮存浓度为20μM)避免反复冻融,GenePharma保证在上述条件下siRNA oligo的稳定性可达到6个...
表1 20μM 储存液的配置参考 siRNA 100uM 20uM RNase-free Water 需加入说明书上的水的体积 加入5倍的体积 说明书示例: 加入33.4ul得到 加入167ul得到 推荐使用GoldenTran®-R或者GoldenTran®-DR进行siRNA在细胞中的转染; 产品A: GoldenTran®-R 运输:常温.保存:2-8℃保存一年. 产品说明: GoldenTran...
表1 20μM 储存液的配置参考 siRNA 100uM 20uM RNase-free Water 需加入说明书上的水的体积 加入5倍的体积 说明书示例: 加入33.4ul得到 加入167ul得到 推荐使用GoldenTran®-R或者GoldenTran®-DR进行siRNA在细胞中的转染; 产品A: GoldenTran®-R 运输:常温.保存:2-8℃保存一年. 产品说明: GoldenTran...
Q:我需要配置浓度为20uM的储存液,如何计算重悬siRNA缓冲液的量? Q:siRNA溶解后保存在-20℃,反复使用多次,会影响siRNA的质量? Q:siRNA使用前是否需要先退火? Q:转染miRNA mimic和inhibitor如何确定转染率? Q:miRNA mimic和inhibitor转染时的浓度是否一样?
siRNA浓度和用量的一般换算:1OD≈33ug≈2.5nmol 1OD加125ul的水,得到20uM的浓度。1ul就是20pmol,在1ml细胞培养液中加1ul(20pmol),那终浓度就是20pmol/ml=20nM。加2ul就是40nM,以此类推。如果按ug计算,1OD加125ug水溶解后,质量浓度为33ug/125ul=0.264ug/ul。
按照Neofect与siRNA(20uM)=1:1的体积混合,不同细胞可适当提高siRNA的用量进行优化。 储存安全 常温运输,储存于4℃,有效期18个月。 注:本产品仅供研究使用,不可用于人或动物的体外诊断与治疗。 For labortory use only. Not for diagmpstic or therapeutic use. ...