近年来有研究利用tRNA-sgRNA融合体并基于CRISPR-Cas9技术成功实现了对解脂耶氏酵母某些基因组位点的编辑。 tRNA-sgRNA融合体具有两大方面的优势:一方面tRNA可以促进sgRNA的表达;另一方面使用tRNA作为启动子驱动sgRNA的表达,消除了在crRNA的5‘端添加G或GG核苷酸的需要。 然而,tRNA-sgRNA融合体系统受到编辑成功率及效率低...
Transfer RNA (tRNA) can link multiple sgRNAs (single-guide RNAs) to form a polycistronic gene, which then combines with a CRISPR/Cas9 (clustered regularly interspaced short palindromic repeats/CRISPRassociated gene 9) expression vector to form a polycistronic tRNA-sgRNA/Cas9 (PTG/Cas9) ...
摘要：tRNA可以将多个sgRNAs连接起来合并成一个多顺反子基因，再与CRISPR/Cas9表达载体结合形成多顺反 子tRNA-sgRNA/Cas9（PTG/Cas9）系统来对多靶点进行基因编辑。该系统已经在水稻中验证其可促进sgRNAs 的转录和提高多靶点的编辑效率。因此，为了在多年生黑麦草中实现高效的基因编辑，本研究中，构建了2个带有 tRNA...
tRNA-sgRNA fusionYarrowia lipolytica is an important oleaginous yeast currently used in the production of specialty chemicals and has a great potential for further applications in lipid biotechnology. Harnessing the full potential of Y. lipolytica is, however, limited by its inherent recalcitrance to ...
pAtU6-26-tRNA-FPA-sgRNA1 中文名: 中文别名: CBNumber: CB313365340 分子式: 分子量: 0 MOL File: Mol file 化学性质安全信息用途供应商1 pAtU6-26-tRNA-FPA-sgRNA1化学性质 安全信息 pAtU6-26-tRNA-FPA-sgRNA1性质、用途与生产工艺 pAtU6-26-tRNA-FPA-sgRNA1上下游产品信息 ...
本发明属于基因编辑和分子生物学领域,具体涉及一种在crispr/cas中改进的新型嵌合trna-sgrna (tgrna) 平台的建立及应用。 背景技术: 1、crispr/cas是一种利用cas蛋白和sgrna精确识别并切割目标dna的基因编辑技术。sgrna包含一个与目标dna配对的导向序列和一个用于结合cas的骨架结构,是crispr系统中的核心组件。sgrna的稳...
因此,基于trna-sgrna序列很快就在水稻、玉米、小麦等单子叶植物中被应用于基因编辑。 早先报道的trna-sgrna表达系统进行目标靶序列的组装是通过goldengate法进行,实现含目标靶序列的多个trna-sgrna表达序列的串联需要设计多条引物,进行多轮pcr才能完成多个靶位点的组装。另外,将目标靶序列连同trna-sgrna序列直接进行化学...
本发明属于基因工程和生物,具体涉及里氏木霉基因组的改造,进一步涉及利用trna多个串联sgrna表达里氏木霉crispr/cas9的建立方法及应用。 背景技术: 1、公开该背景技术部分的信息仅仅旨在增加对本发明的总体背景的理解,而不必然被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已经成为本领域一般技术人员所公知的现有技术。
本发明提供了一种tRNA‑sgRNA表达序列,其特征在于:tRNA、typeII内切酶位点、sgRNA依次连接构成单元序列,4个所述单元序列串联排列,串联排列的4个单元序列中所述type II内切酶位点依次分别为BbsI、BsaI、BsmBI和BfuAI。本发明提供的tRNA‑sgRNA表达序列,使多个目标靶序列的组装可以逐步组装到tRNA‑sgRNA表达载体中,...
本发明提供了一种tRNA‑sgRNA表达序列,其特征在于:tRNA、typeII内切酶位点、sgRNA依次连接构成单元序列,4个所述单元序列串联排列,串联排列的4个单元序列中所述type II内切酶位点依次分别为BbsI、BsaI、BsmBI和BfuAI。本发明提供的tRNA‑sgRNA表达序列,使多个目标靶序列的组装可以逐步组装到tRNA‑sgRNA表达载体中,实现...