我们也优化了pLVXS-sgRNA-mCherry-hyg载体中的sgRNA scaffold序列,有助于加强Cas9-sgRNA之间的相互作用,实现高基因编辑效率。本系统通过使用高滴度的慢病毒包装系统Lenti-X Packaging Single Shots,可以有效维持慢病毒sgRNA文库的代表性。 应用: · 人细胞全基因组表型筛选 · 功能缺失型遗传
(1)利用软件snapgene设计含有sgrna-1的表达元件序列sgrna(teta),并在杭州擎科梓熙生物技术公司合成该序列,表达元件包含原核生物j23119(spei)启动子、上述sgrna-1、grnascaffold序列和终止子序列,其序列如序列1所示。 (2)将步骤(1)合成的sgrna(teta)插入到puc57载体中,得到载体puc57-sgrna(teta),并将该载体转化入...