在这种情况下,高盐浓度含量抑制抗体和SEC固定相之间的相互作用,从而导致更高的二聚体和单体峰的峰分辨率。此外,聚集体和单体的分辨率降低时,使用通用的非生物惰性SEC柱硬件,从而导致RS值较低和聚集物种(四聚体)较高。 结论 SEC-MALS分析抗体可以用于定量和得到较高的回收率。然而,只有SEC-MS能提供用于表征的准确
SEC-MALS特别适合于测量这些病毒载体的总颗粒浓度、空壳率、病毒蛋白质和核酸部分的摩尔质量等属性。其结果在所有血清型中都是可靠的,且无需复杂的引物或复杂的样品制备,方法学完全和沃特世SEC色谱方法兼容。与其他技术相比,SEC-MALS结果更直观准确,和现有色谱方法更兼容,且可用于验证PCR或ELISA检测。结合ASTRA软件的21...
首先通过高效液相色谱的SEC柱根据供试品不同组分的不同分子尺寸分离出不同的峰(图1),再通过激光光散射检测器利用色谱柱分离出的样品在各个角度的光散射强度测量分子的尺寸大小(图2),通过示差折光检测器测出供试品洗脱液的浓度(图3),从而计算出各个组分的绝对分子质量和占比。 △图1. 尺寸排阻色谱原理示意图 △...
SEC能够有效地根据分子大小对样品进行分离,而MALS则提供关于分子量和形态的精确测量,因此SEC-MALS分析能够提供关于分子结构和聚集状态的详细信息。分子筛层析-多角度激光光散射分析(SEC-MALS 分析)在蛋白质组学研究中,尤其是在研究蛋白质的折叠状态、聚集行为以及与其他分子的相互作用方面。通过对蛋白质的绝对分子量进行...
SEC-MALS(Size Exclusion Chromatography - Multi-Angle Light Scattering)是一种联用尺寸排阻色谱(SEC)和多角度激光散射(MALS)以精确测量分子质量和分子大小的绝对测定技术。SEC根据不同分子量大小的蛋白通过多孔载体时所用的时间不同实现样品分离,而MALS技术则通过测量每个分子在不同角度下的散射光强度,计算获得分子的...
SEC-MALS技术在乙基纤维素分子表征领域的应用 1前言 药用辅料，作为药品生产与调配处方中的关键成分，扮演着赋形、载体及提高稳定性的多重角色。此外，它们还具备增溶、助溶、缓控释等不可或缺的功能，对药品的质量、安全性和有效性产生深远影响。然而，我国药用辅料的现状仍面临品种规格有限、质量参差不齐以及检测...
SEC分离后，组分进入多角度光散射检测器，激光照射产生散射，MALS同时测定多角度散射光强度，该强度与摩尔质量、浓度、折光指数增量平方成正比，直接计算绝对分子量。因此，SEC-MALS在制药领域广泛用于研发、分析，表征蛋白和聚合物，评估溶液特性，工艺开发及质量控制。图1 多角度光散射技术原理示意图 明捷医药基于Waters ...
作为外泌体(EV)的分析实例,细胞培养上清液的EV制备过程,使用聚合物基质水溶性SEC(GFC)色谱柱OHpak SB-806 HQ和各种检测器配合进行分析。UV (280 nm)对于所有培养的不纯物质,荧光 (Ex 280 nm / Em 348 nm)主要对于蛋白质(Trp残基做标准),MALS光散射检测器(LS)对于纳米粒子具有高灵敏度。另外MALS还能推得...
由图2可知,对比线性和支化PVDF的激光MALS和示差dRI峰型可知,其中支化PVDF的激光谱图峰型不对称性表现更为明显,分布也更宽,这与表1得到的结果相一致。峰型的不对称性除了与Mw及分布有关外,还与PVDF分子支化程度和结构有关。 结果与讨论 SEC-MALS是非常适用于表征此类高支化结构的天然高分子,比如PVDF、天然、...
UV(280 nm)用于检测生物源性杂质整体,荧光(FL; Ex 280 nm / Em 348 nm)主要用于检测蛋白质(以Trp残基为指标),MALS散射(LS)特别对纳米粒子类别的大型目标产生高灵敏度的响应。此外,通过MALS可以得到目标的旋转半径(RMS radius)的估计值。 根据MALS的信息,大约13分钟附近是以外泌体(EV)为主要组分的区域,并且...