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分子筛hplc,又称为体积排阻色谱(size exclusionchromatograghy,sec),小分子量的化合物进入凝胶孔中,滞留时间长;大分子量的化合物不能进入孔中,会更早的被洗脱下来。分子筛色谱的优势在于能够处理至少1nmol的目的蛋白,并得到很好的分离效果,分离时间也很短,一般在3个小时以内,同时获得的层析分离峰也更小。sec进行蛋...
欧洲药品管理局(EMA)公开的检测方法包括通过反相液相色谱(RP-HPLC)或CGE测定mRNA纯度/完整性。RP-HPLC和CGE测定mRNA纯度均涉及变性处理,阻碍了对其非共价聚集体的检测。1.3 LNP-mRNA聚集体 LNP尺寸和多分散性通常使用动态光散射(DLS)检测。然而,DLS 存在局限性,包括无法区分双峰大小群体。LNP的结构和形态通常...
分子筛是一种包含有精确和单一的微小孔洞的材料,可用于吸附气体或液体。分子筛HPLC,又称为体积排阻色谱(size exclusion chromatograghy, SEC),小分子量的化合物进入凝胶孔中,滞留时间长;大分子量的化合物不能进入孔中,会更早的被洗脱下来。分子筛色谱的优势在于能够处理至少1nmol的目的蛋白,并得到很好的分离效果,分...
欧洲药品管理局(EMA)公开的检测方法包括通过反相液相色谱(RP-HPLC)或CGE测定mRNA纯度/完整性。RP-HPLC和CGE测定mRNA纯度均涉及变性处理,阻碍了对其非共价聚集体的检测。 1.3 LNP-mRNA聚集体 LNP尺寸和多分散性通常使用动态光散射(DLS)检测。然而,DLS 存在局限性,包括无法区分双峰大小群体。LNP的结构和形态通常成像或...
欧洲药品管理局(EMA)公开的检测方法包括通过反相液相色谱(RP-HPLC)或CGE测定mRNA纯度/完整性。RP-HPLC和CGE测定mRNA纯度均涉及变性处理,阻碍了对其非共价聚集体的检测。 1.3 LNP-mRNA聚集体 LNP尺寸和多分散性通常使用动态光散射(DLS)检测。然而,DLS 存在局限性,包括无法区分双峰大小群体。LNP的结构和形态通常成像或...
1.系统平衡:使用与样品稀释相同的缓冲液,平衡SEC-HPLC系统,直到基线稳定。 2.加载样品:通过自动进样器或手动方式,将准备好的样品加载到色谱系统中。 3.洗脱和检测:以恒定的流速通过色谱柱,蛋白质将根据其大小依次洗脱,并通过检测器(通常为紫外检测器)记录洗脱曲线。
高效SEC-HPLC是一种常用的蛋白质纯度检测方法,其基于蛋白质在分子筛柱中的分离原理。本文将介绍高效SEC-HPLC的原理、步骤和应用,并着重探讨优化和改进SEC-HPLC方法的关键因素。通过优化SEC-HPLC方法,我们可以提高蛋白质纯度的测定精度和灵敏度,为蛋白质研究和生物药物开发提供有力支持。1.高效SEC-HPLC的原理 高效...
一、高效SEC-HPLC的原理 高效SEC-HPLC利用分子筛柱对蛋白质进行分子大小的分离,从而实现对蛋白质纯度的检测。较大分子量的蛋白质会较快地通过柱床,而较小分子量的杂质则会滞留更长时间。通过检测样品中蛋白质的峰形和相对峰面积,可以评估蛋白质纯度的高低。