在SDS-PAGE实验中,样品需要与上样缓冲液混合,然后在高温下煮沸以使蛋白质变性。因此,你需要考虑上样缓冲液的体积以确保你的样品体积加上样品缓冲液的体积不会超过凝胶孔的容量。 下面通过一个具体例子来说明: 1、假设你的蛋白质浓度是2 µg/µl,你想要上样的量是20 µg,那么你需要上样的体积就是20 µg / 2
首先做BCA定量;常用蛋白质量20-30ug,这样去÷定量后的蛋白样本浓度得到蛋白上样体积;然后根据你的上样缓冲液浓度和SDS胶的情况去选择计算,最后用双蒸水补齐。聚丙烯酰胺凝胶电泳(英语: polyacrylamide gel electrophoresis,简称PAGE) ,是以聚丙烯酰胺凝胶作为支持介质的一种常用电泳技术,用于分离蛋白...
SDS-PAGE电泳的方法学要怎么做,有没有模板,具体哪些方面需要做的,救急。比如说专属性,准确性,精密...
除了BCA方法,也可以粗略地通过超微紫外分光光度计测出浓度。以此粗略估计上样量。
首先做BCA定量;常用蛋白质量20-30ug,这样去÷定量后的蛋白样本浓度得到蛋白上样体积;然后根据你的上样缓冲液浓度和SDS胶的情况去选择计算,最后用双蒸水补齐。 聚丙烯酰胺凝胶电泳(英语: polyacrylamide gel electrophoresis,简称PAGE) ,是以聚丙烯酰胺凝胶作为支持介质的一种常用电泳技术,用于分离蛋白质和寡核苷酸。 作...
在做SDS-PAGE时,倒的是12%的下层分离胶, H2O: 1.23ml, 甲叉丙烯酰胺30%:1.7ml, Tris-hcl(ph8.8, 1.5M): 0.95ml, 10%sds: 38ul, aps:38ul, TMEMD: 3ul.奇怪的是在胶的两侧出现了不少绿豆大小的气泡,请高人指教.是否因为天气转暖, TEMED量加过了? 展开 ...
SDS对粘膜和上呼吸道有刺激作用,对眼和皮肤有刺激作用.可引起呼吸系统过敏性反应. 如果是变性胶的话…… DTT或Beta巯基乙醇也略有毒,Beta巯基乙醇毒性大一些. (严格说来都有毒……Tris好像没事) 戴手套,尽快操作,有通风橱最好. 之后的银染或者转膜中有些试剂也有弱毒性,稍微小心一点就可以了 分析总结。 丙烯...
做SDS-PAGE电泳时,自己配的30%丙烯酰胺有点显蓝色是怎么回事?是不是买的丙烯酰胺坏了?另外丙烯酰胺...
是分离胶和浓缩胶分界么?可能是一些蛋白残余,没有完全进入的缘故。你在转移或显色的时候去掉好了。
做SDSPAGE,哪些试剂是有毒性的,要怎么防范960化工网专业团队、用户为您解答,有做SDSPAGE,哪些试剂是有毒性的,要怎么防范的疑问