SDS-PAGE法利用SDS（十二烷基硫酸钠）对蛋白质进行解性和变性处理，使其带有负电荷，并通过电场力使蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶中迁移。根据蛋白质分子量与迁移距离之间的关系，可以推断出蛋白质的相对分子量。2.SDS-PAGE法的步骤 （1）样品准备：将待测蛋白质样品进行解性和变性处理，并添加SDS和还原剂
1 标准蛋白样品的制备：根据待测样品的理论分子量或根据其他参数选用适宜大小的蛋白质分子量标准。2 待测蛋白质样品的制备：取蛋白质样品加入等体积2×SDS-PAGE上样缓冲液，混匀，在沸水浴中加热3min。3 电泳分离与染色：当电泳前沿（溴酚蓝指示剂）移动至胶边缘时，结束电泳，取下胶板，切去浓缩胶，将整块胶浸没...
Tip:通过BCA分析法,分析牛奶中蛋白质的含量,在通过SDS-PAGE和Coomassie Blue染色观察蛋白质电脉冲结果的基础上,进行Western Blot,使membrane transfer,通过实验熟知利用抗原-抗体反应对特定蛋白质进行定量分…
本实验旨在Laemmli方法的基础上,采用N-三羟甲基甘氨酸(Tricine)代替常用的甘氨酸,用Tricine-SDS-PAGE方法慢离子电泳分析腮腺唾液蛋白,探求适合于腮腺唾液蛋白分析的电泳方法,同时改进常规的染色方法,确定CBB R-250染色后紫红色区带和蓝色区带的数目,为进一步研究唾液蛋白提供方法学依据。 1 材料和方法 1.1 试剂 Tricine...
SDS -PAGE (十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳)是分析生物体蛋白质常用的方法,其技术多采用Laemmli (1970)分析细菌蛋白的方法。由于木本植物组织中的色素、酚、醌等次生代谢物质较细菌和草本植物中的多,因而SDS -PAGE 分析受到了很大的干扰,加之蛋白提取、定量以及凝胶染色、脱色方法多种多样,造成电泳结果不稳定和...
蛋白含量的测定采用考马斯亮蓝G-250(CBBG-250)微板法[5],以牛血清白蛋白(BSA)为标准。 1.4 腮腺唾液蛋白的Tricine-SDS-PAGE分析 参照Schgger等[3]的方法进行。电泳装置为Mini-protean Ⅱ型电泳仪(Bio-rad产品),板胶厚0.75 mm。分离胶浓度分别为16.5%和10%,浓缩胶浓度为4%。采用不连续缓冲系统,阳极缓冲液...
SDS——PAGE法测酪蛋白的分子量,为什么没有跑出完整的maker条带 ,大神帮我分析下原因。还 SDS——PAGE法测酪蛋白的分子量,为什么没有跑出完整的maker条带 ,大神帮我分析下原因。还有近似的测出的分子量也不是酪蛋白的理论值,老师说是什么聚合物,不懂,求解释。 如果是
生物化学实验 课件 第一章实验五蛋白质的分离_十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳_SDS_PAGE 生物化学实验--小牛肠碱性磷酸酶的提纯及酶活的测定、SDS-PAGE电泳法测定蛋白质相对分子质量 双向凝胶电泳银染蛋白质点的肽质谱指纹图分析 蛋白质银染原理与方法.doc 微卫星DNA聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)银染法的改良 使用优化PA...
buffer在95-100度中煮5-10min，从而打开蛋白的空间结构，使蛋白线性化，这样才能利用SDS-PAGE的分子筛...
江苏农学院学报第16卷。实验室技术。蛋白质分析中SDS一PAGE银染法与考马斯亮蓝染色法敏感性的比较高裕刘秀梵张如宽江苏农学院动物医学系扬州5009sDs一PAGE技术是蛋白质分析最常用的手段之一。SDS一PAGE分离后的条带通常采用考马斯亮蓝进行染色。80年代产生了一种更为敏感的