生物化学-杨荣武-25届考研生物化学全程课(听了会做题!)已全部完结! 配合专题训练讲解哦 1230 -- 3:03 App SDS-PAGE蛋白电泳样本处理操作流程 2468 -- 2:31 App SDS-PAGE装板示范 1043 -- 5:03 App 制胶过程的介绍 5.7万 145 25:36 App 【实验】SDS-PAGE蛋白凝胶电泳的基本原
溴酚蓝指示剂迁移至胶底时终止电泳,全程需维持低温(4℃)防止蛋白降解。 三、应用与拓展 基础蛋白质分析 用于检测蛋白质纯度(单一条带)、测定分子量(对比Marker)及半定量分析(条带灰度值)。考马斯亮蓝染色可检测μg级蛋白,银染灵敏度达ng级。 Western Blotting前处理 电泳后通过转膜将蛋白...
不可能这么快的。从浓缩胶进入分离胶就需要30min的。一般全程下来需要大概2-3个小时的。你的胶或者是电压有问题。你什么参数都没告诉,我们也不知道怎么解答。一般的胶的配方网上都有。我跑的都很正常。还有,不知道你加marker没有,marker说明书上一般会给条件。也不知道你的胶是%多少的。可能的话...
- 理想胶质:无气泡,透明,均匀,这是检验成功的标志。延伸分享:从凝胶制备到Western blot的全程技巧,乃至论文撰写和实验优化,都是科研之路的瑰宝。如果您有任何疑问,欢迎通过微信联系我:_17665739136,付费咨询服务助您一臂之力。同时,更多科研心得和资源,尽在知乎系列文章,点击链接探索更多。在老龄...
全程大约需要1-2h。 5.将电泳后的PAGE胶取下放在塑料盒中,加入适量染色液,室温,于摇床上慢慢摇动30min。 6. 将胶转移至脱色液中,在摇床上摇动5-10min,弃去脱色液(此时蛋白条带应已可见)。可换脱色液继续脱色至条带清晰。 7.若要快速染色,可将塑料盒放入微波炉中加热至沸腾。取出后于室温,置于摇床上慢...
将收集好的菌用PBS洗2次,接着加入盐酸胍裂解液重悬收集的细胞沉淀,冰浴超声裂解(工作10 s,间歇10 s,全程时间10 s,300 W);8 000 r/20 min离心,上清液清亮。1,2,3,4,5,6,,10号抗原是包涵体,分别用2 mol/L,4 mol/L,尿素各洗一次,一般溶解后4度在摇床上摇20min在离心1500g 30min收集沉淀,洗掉少许...
染色快,无需脱色,尤其对于蛋白纯化的实验,数分钟后可以依 据蛋白染色条带结果,决定下一步实验。全程易操作,易保存, 不需特殊设备,脱色后凝胶可在纯水中保存数月。 四、使用范围 本产品适用于实验室自己配制或者预制的SDS-PAGE胶及Native 胶, 也可以用于Western转膜后PAGE胶上残余蛋白的染色。
本公司生产的新SDS-PAGE凝胶配制试剂盒(SDS-PAGE GelParparation Kit)提供了配制SDS-PAGE凝胶所需的各种试剂,用户只需自备制胶器具和蒸馏水,即可配制PAGE胶了。 ■ 产品特点 1.操作简单:由传统的5种成分优化为3种成分。 2.安全无毒:全程看不见TEMED的影子。
全程易操作,易保存,不需特殊设备,脱色后 凝胶可在纯水中保存数周。凝胶染液原理与传 统考染相同,可采用相同步骤 切胶打质谱。 18.001.03/18.001.05/18.001.10考马斯亮蓝蛋白胶极速染色液使用方法: 1.将电泳后的 PAGE 胶取下放入塑料容器中, 加入适量染色液覆盖PAGE胶,取决于容器大小,通常约为20-25ml。 2....
电泳槽安装需检查玻璃板底部与缓冲液槽接触面是否存在漏液,电极丝是否完全浸入缓冲液。若条带仅局部扭曲,可排查上样孔内存在未溶解颗粒或离心不彻底导致样品分布不均。问题二:目标条带弥散呈宽峰状。蛋白质降解是首要诱因,需全程保持低温操作,裂解液中添加足量蛋白酶抑制剂混合物。建议将样品分装后于-80℃保存...