在进行SDS-PAGE电泳时,使用合适的上样缓冲液至关重要。以下是一个简单而有效的5xSDS-PAGE Loading Buffer的配方,帮助你更好地分离和可视化蛋白质。📏 配方组分: 250mM Tris-HCl(pH 6.8) 10%(W/V) SDS 0.5%(W/V) BPB 50%(V/V) 甘油 5%(W/V) β-巯基乙醇🔬 配制步骤: 将1.25mL 1M Tris-HCl、...
5×SDS-PAGE Loading Buffer的配制(方案一):(5ml) (本方案摘自Takara网站) 组分:Tris-HCl pH6.8(250mM);SDS(10%);溴酚兰(0.5%);甘油(50%);β-巯基乙醇(5%) 配制过程: 1.量取1M Tris-HCl(pH6.8)1.25ml;甘油 2.5ml;称取SDS固体粉末0.5g;溴酚兰25mg; 2.加入去离子水溶解后定容至5ml; 3.小份(...
4.使用前将25μl的2-ME加到每小份中。 5.加入2-ME的Loading Buffer可在室温下保存一个月左右
另:Takara公司Catalog-N5上的5×SDS－PAGE Loading Buffer配方：组分浓度：配制量5 ml 配制方法 1．称量下列试剂置于10ml塑料离心管中。2．加去离子水溶解后定容至5 ml。3．小份（500 ul/份）分装后于室温保存。4．使用前将25 ul的2-ME加到每小份中。5．加入2-ME的Loading Buffer可在室温下保存一个月左右...
本制品适用于蛋白质电泳(SDS-PAGE)上样时使用。与样品等体积混合(例如向10μl样品中加入10μl 2×loading buffer),煮沸5分钟,然后置于冰上冷却后上样。 产品组分: 100mM Tris-Cl(pH6.8);200mM DTT;4% SDS;20%甘油;0.1%溴酚蓝 储存条件:-20℃ ...
-配方为: 30g Tris base (pH 6.8) 144g glycine 1gSDS 将固体溶解于1L蒸馏水中,并调整pH至6.8 四、样品处理缓冲液配方: 1. 样品加载缓冲液(sample loading buffer) -用于处理蛋白样品,以便在凝胶上获得良好的分离效果。 -配方为: 0.5M Tris-HCl(pH 6.8) 20%(v/v)甘油 10%(w/v)SDS 0.05%(w/v)溴...
我想说以下几点:1.SDS-PAGE loading buffer一般配成2X 的,5X loading buffer确实过于粘稠,且SDS在低温下难溶于水,这就导致你配的buffer“摇都摇不动”了2.不知你为何要配那么多loading buffer(况且是5X的),这些东西都是用量很少的,建议你少配些,比如……10 ml?3.以下就以2X loading buffer(配制10 ml)为...
配胶用的buffer为TRIS-HCl 浓缩胶和分离胶ph不一样；电极buffer中TRIS-HCl还有甘氨酸还有SDS（不过不同的SDS-PAGE中甘氨酸可被其他东西代替）；上样buffer也就是（loading buffer）中TRIS-HCl、SDS、甘油（有的是蔗糖）、溴酚蓝（有的还有酚红）、DTT或巯基乙醇（非还原电泳中不含这种成分）。
5×SDS-PAGE 加样缓冲液--- 5×SDS-PAGE Loading Buffer 【组分浓度】0.25MTris-HCL(pH6.8); 10%(W/V)SDS; 0.5%(W/V) BPB(溴酚蓝); 50%(V/V) 甘油; 5%(W/V)β-巯基乙醇(2-ME) 各种组分名称 配制不同体积所需各成分的体积(mL)或质量(g) 5ml 3ml 1MTris-HCL(pH6.8) 1.25ml SDS 0.5g...