在进行SDS-PAGE电泳时,使用合适的上样缓冲液至关重要。以下是一个简单而有效的5xSDS-PAGE Loading Buffer的配方,帮助你更好地分离和可视化蛋白质。📏 配方组分: 250mM Tris-HCl(pH 6.8) 10%(W/V) SDS 0.5%(W/V) BPB 50%(V/V) 甘油 5%(W/V) β-巯基乙醇🔬 配制步骤: 将1.25mL 1M Tris-HCl、...
5×SDS-PAGE Loading Buffer配制方法 组份浓度: 250mM Tris-HCl(pH6.8) 10%(W/V) SDS 0.5%(W/V) BPB 50%(V/V) 甘油 5%(W/V) β-巯基乙醇 配制量: 5mL 配制方法: 1.量取下列试剂,置于10mL塑料离心管中。 1M Tris-HCl 1.25mL SDS 0.5g BPB 25mg 甘油2.5mL 2.加入去离子水溶解后定容至5mL...
5×SDS-PAGE Loading Buffer 配制方法 组份浓度 250mM Tris-HCl pH6.8 10 W/V SDS 0.5 W/V BPB 50 V/V 甘油 5 W/V β -巯基乙醇 配制量 5mL 配制方法 1.量取下列试剂 置于 10mL 塑料离心管中。 1M Tris-HCl 1.25mL SDS 0.5g BPB 25mg 甘油 2.5mL 2.加入去离子水溶解后定容至 5mL。 3.小...
另:Takara公司Catalog-N5上的5×SDS-PAGE Loading Buffer配方:组分浓度:配制量5 ml 配制方法 1.称量下列试剂置于10ml塑料离心管中。2.加去离子水溶解后定容至5 ml。3.小份(500 ul/份)分装后于室温保存。4.使用前将25 ul的2-ME加到每小份中。5.加入2-ME的Loading Buffer可在室温下保存一个月左右...
SDS样品缓冲液(Loading buffer): 通常含有SDS、甘油、溴酚蓝、DTT或β-巯基乙醇(还原剂)等成分。 Marker(蛋白分子量标准) 电泳装置 电泳仪与电源 考马斯亮蓝染色液(或其他染色液) 实验步骤 一、制备SDS-PAGE凝胶 准备分离胶和浓缩胶 按照不同的蛋白质大小,选择合适的分离胶浓度(常见为10-15%)。具体配方如下:...
5×SDS-PAGE Loading Buffer的配制(方案一):(5 ml) (本方案摘自Takara网站) 组分:Tris-HCl? pH6.8(250 mM);SDS (10%);溴酚兰(0.5%);甘油(50%);β-巯基乙醇(5%) 配制过程: 1. 量取1M Tris-HCl (pH6.8) 1.25 ml;甘油2.5 ml;称取SDS固体粉末0.5 g;溴酚兰25 mg; ...
-配方为: 30g Tris base (pH 6.8) 144g glycine 1gSDS 将固体溶解于1L蒸馏水中,并调整pH至6.8 四、样品处理缓冲液配方: 1. 样品加载缓冲液(sample loading buffer) -用于处理蛋白样品,以便在凝胶上获得良好的分离效果。 -配方为: 0.5M Tris-HCl(pH 6.8) 20%(v/v)甘油 10%(w/v)SDS 0.05%(w/v)溴...
下面以配制2X loading buffer(10毫升)为例,介绍具体步骤。首先,你需要准备1摩尔/升的Tris-HCl(pH 6.8)和10%的SDS溶液。接着,将0.02克溴酚蓝放入小烧杯中,然后依次添加1摩尔/升Tris-HCl(pH 6.8)1毫升,10%SDS溶液4毫升,甘油2毫升,去离子水2毫升,以及2-巯基乙醇1毫升。充分混匀后...
本制品适用于蛋白质电泳(SDS-PAGE)上样时使用。与样品等体积混合(例如向10μl样品中加入10μl 2×loading buffer),煮沸5分钟,然后置于冰上冷却后上样。 产品组分: 100mM Tris-Cl(pH6.8);200mM DTT;4% SDS;20%甘油;0.1%溴酚蓝 储存条件:-20℃ ...