一、SDS-PAGE电泳技术概念 SDS-PAGE电泳,全称为SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,是一种常用的蛋白质分离技术,聚丙烯酰胺凝胶是由丙烯酰胺(Acr)和交联剂N,N’一亚甲基双丙烯酰胺(Bis)在催化剂过硫酸铵(APS),N,N,N’,N’四甲基乙二胺(TEMED)作用下,聚合交联形成的具有网状立体结构的凝胶,并以此为支持物进行电泳。 ...
3. 配制分离胶溶液：• 在干燥、干净的烧杯中按照配方表中的比例混合水、30%丙烯酰胺、1.5 M Tris-HCl (pH 8.8)、10% SDS、10% APS 和 TEMED。TEMED必须是最后 加入的成分。• 搅拌均匀后，立即倒入组装好的玻璃板中，确保均匀分布。• 用水或异丙醇覆盖凝胶表面，以保持均匀的表面，室温下凝固...
解析 APS是过硫酸铵,用于产生自由基,自由基引发丙烯酰胺聚合;TEMED是N,N,N',N'-四甲基乙二胺,用于催化APS产生自由基 结果一 题目 在SDS-PAGE中分离胶与浓缩胶中均含有TEMED和APS,试述其作用? 答案 APS是过硫酸铵,用于产生自由基,自由基引发丙烯酰胺聚合;TEMED是N,N,N',N'-四甲基乙二胺,用于催化APS产生...
聚丙烯酰胺凝胶是由丙烯酰胺(简称Acr)和交联剂N,N'-亚甲基双丙烯酰胺(简称Bis)在催化剂过硫酸铵(APS),N,N,N',N’-四甲基乙二胺(TEMED)作用下,聚合交联形成的具有网状立体结构的凝胶,并以此为支持物进行电泳。 2.1 电泳缓冲液(1000ml配方) 2.2考马斯亮蓝染色液(1000ml配方) 2.3 脱色液(1000ml配方) 2.4 ...
而浓度降低后就难以实现1000与1100的分离。化学聚合以过硫酸铵（APS）为催化剂，以四甲基乙二胺（TEMED）为加速剂。在聚合过程中，TEMED催化过硫酸铵产生自由基，后者引发丙烯酰胺单体聚合，同时甲叉双丙烯酰胺与丙烯酰胺链间产生甲叉键交联，从而形成三维网状结构。
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SDS-PAGE是十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳,是以聚丙烯酰胺凝胶作为支持介质的一种常用电泳技术,用于分离蛋白质和寡核苷酸。聚丙烯酰胺凝胶由单体丙烯酰胺和甲叉双丙烯酰胺聚合而成。其中四甲基乙二胺(TEMED)作为加速剂能催化过硫酸铵产生自由基。过硫酸铵(APS)作为催化剂产生自由基,从而引发丙烯酰胺单体聚合,同时甲...
SDS-PAGE相关溶液的配方（10%过硫酸铵、5×电泳缓冲液、5×上样缓冲液）10%（W/V,g/ml）过硫酸铵（APs）的配制：（1ml）1.称取0.1g过硫酸铵；2.加入1ml的去离子水，将固体粉末彻底溶解；3.贮存于4℃。注意：10%过硫酸铵最好现配现用，配好的溶液在4℃保存可使用2周左右，过期会失去催化效果。5×...
10%(W/V, g/ml)过硫酸铵(APs)的配制:(100 ml) 1. 称取10g过硫酸铵; 2. 加入100 ml的去离子水,将固体粉末彻底溶解; 3. 贮存于4℃。 注意:10%过硫酸铵最好现配现用,配好的溶液在4℃保存可使用2周左右,过期会失去催化效果。 5×Tris-Glycine电泳缓冲液的配制:(1 L) 1. 称取Tris粉末15.1 g、...
过硫酸铵APS 过硫酸铵在水溶液中能水解成硫酸氢铵和过氧化氢,为制备PAGE胶提供自由基。过硫酸铵易潮解失效,建议小瓶分装。过硫酸铵打开后建议一次性配成10%水溶液,分装冻于-20度。 缓冲体系 SDS-PAGE使用的*广泛的是TriGlycine体系,通常适用于10-300kDa的蛋白质分...