一般来说,对于大部分的SDS-PAGE实验,每个样品孔的上样量通常在10-50微克之间。具体的上样量取决于你的实验目的和样品的性质。 一旦你确定了你的样品中蛋白质的浓度和你想要的上样量,你就可以计算出需要上样的体积。 公式是:上样体积(µl) = 上样量(µg) / 蛋白质浓度(µg/µl)。 在SDS-PAGE实...
解析 最佳答案 对分辨率的影响其实还真是次要的,多跑一会儿分辨率就上去了.上样量太大,最主要的影响是会是聚丙烯酰胺凝胶中的胶孔堵塞,蛋白质下行变慢,并且在垂直电压的挤压下横向运动,排挤旁侧泳道,甚至造成胶孔塌陷,毁掉整块凝胶.结果一 题目 SDS—PAGE中,上样量的多少对实验结果产生的影响 答案 对分辨率的...
一般认为是 ug 量级.以每条带 能观察到的蛋白质总量为比较对象.1.跟你的样品纯度有关.如果是一个纯蛋白,需要上样量就极少,可以到1ug 甚至更少.如果有10条带的话,那就增加总量大概10倍(10种蛋白含量相当的话),使你... 分析总结。 一般对于sdspage上样量都是说上样多少ul我想问下sdspage能检测到的蛋白...
而SDS-PAGE仅根据蛋白质亚基分子量的不同就可以分开蛋白质。该技术最初由shapiro于1967年建立,他们发现在样品介质和丙烯酰胺凝胶中加入离子去污剂和强还原剂(SDS即十二烷基硫酸钠)后,蛋白质亚基的电泳迁移率主要取决于亚基分子量的大小(可以忽略电荷因素)。
没什么特别要注意的吧,就是点样不容易,点样槽不容易看出来,要仔细辨认。再来就是点样时要注意手上的力道,不能打太多溢出来,相邻的几个样品就被污染了,整个胶板也有可能要重做。也不能提前松手,要不然移液枪会吸到胶,一管样品就报废了 好像就这么多吧,也不是什么太难的操作 ...
除了BCA方法,也可以粗略地通过超微紫外分光光度计测出浓度。以此粗略估计上样量。
这样去÷定量后的蛋白样本浓度得到蛋白上样体积;然后根据你的上样缓冲液浓度和SDS胶的情况去选择计算,...
1请帮我分析下SDS-PAGE电泳图我用的4倍上样缓冲液,上样量大概45ug。请问那个最上面跟泡似的是怎么回事啊?目的条带250kda,130kda都不是很清楚。我用的5%浓缩胶,15%分离胶 2 请帮我分析下SDS-PAGE电泳图我用的4倍上样缓冲液,上样量大概45ug。请问那个最上面跟泡似的是怎么回事啊?目的条带250kda,130kda...
sdspage电泳 样品的量应该多少 浓度没有硬性要求,但上样时的蛋白质总量最好在50-100ug左右。条带才比较明显可见。如若上样前浓度很低,可进行冻干,把体积浓缩一下测完蛋白浓度后上样。常规样品都不用去管PH值,因为上样缓冲液中含有TRIS-HCl,缓冲力比较强,可以中和你样品PH.除非你样品中盐离子(...