解析 将样品煮沸是为了使蛋白变性,离心是去除样品中没有溶解的东西,避免带出现纹理现象. 分析总结。 另外我这里没有一些配料所有就用的琼脂糖凝胶混入一些sds跑出来的条带里有拖尾现象而且没有跑出单个条带来不知道是那里出了问题结果一 题目 做sds-page电泳时有一步是要将样本煮沸低温离心的,请问这一步有什么用...
SDS-PAGE电泳你做的是变性电泳,也就是加SDS,并需要沸煮的。在沸煮过程中,蛋白样品必然变性由原来的球状变成线性,但是形成的时候蛋白质-SDS复合物,所以不会沉淀。这种复合物在凝胶中迁移率只跟蛋白质分子量大小有关,所以能进行蛋白的分离鉴定。Marker一般都是预变性的也就是预煮过的,所以可以不...
解析 那是你沉淀太多了,你这样跑电泳就算是上样成功蛋白量也会很大,跑出来的条带很粗很难看.建议你少取点沉淀,或者煮完后离下心,用上清电泳. 分析总结。 那是你沉淀太多了你这样跑电泳就算是上样成功蛋白量也会很大跑出来的条带很粗很难看结果一 题目 sds-page电泳:细胞破碎后离心,取沉淀加SDS煮沸,但是上样...
更准确点。0-30min煮样时间都是正常的,一般常用10min水浴,如果跑胶不是很好看的话,你可以再多煮...
通过加热和SDS可以使蛋白质变性,多亚基的蛋白质也将解离为单亚基。同时还原剂可以切断蛋白质中的任何一个二硫键(使二硫键还原)。经过这样处理的样品中的肽链都是处于无二硫键连接的,分离的状态。参考资料:http://hi.baidu.com/xujunguo/blog/item/db25bf16345ccb4221a4e902.html ...
做原核表达跑SDS-PAGE时,样品为什么粘稠离不下去,偶尔还会根本不能上样,飘的很厉害.样品制备:1ml菌液,离心,80微升PBS重悬沉淀,加20微升5×buffer,煮3min,离心上样.请问,直接煮也可以破碎菌体吧?我看很多人都这样做。 扫码下载作业帮搜索答疑一搜即得
煮沸是破裂细胞壁的一种方法,如果不破碎,那基本上是跑不出来的
弱弱的问下跑SDS-PAGE胶时什么情况下必须沸水煮样,什么情况下不需要或者不能煮样,另外煮样的目的是...
另外,我这里没有一些配料,所有就用的琼脂糖凝胶混入一些sds,跑出来的条带里有拖尾现象,而且没有跑出单个条带来、不知道是那里出了问题.琼脂糖的浓度是3.5%,里面sds是0.1% 扫码下载作业帮搜索答疑一搜即得 答案解析 查看更多优质解析 解答一 举报 将样品煮沸是为了使蛋白变性,离心是去除样品中没有溶解的东西,避免...
但是发酵液超滤浓缩以后,样品加热煮过之后SDS-PAGE只在30K左右有一条带,不加热直接上样,SDS-PAGE在...