8. 上层胶中电泳出现“漏样”:• 原因:玻璃板与胶局部分离,上样缓冲液问题。• 解决方案:小心取下玻璃板,避免分离,上样时避免枪头插得太深。9. 泳道中心凹陷:• 原因:梳子插入后胶暴露于空气中时间过长。• 解决方案:尽量在 25 分钟内插入梳子,避免长时间暴露。结语 通过详细了解SDS-PAGE凝胶的配制
8. 上层胶中电泳出现“漏样”: • 原因:玻璃板与胶局部分离,上样缓冲液问题。 • 解决方案:小心取下玻璃板,避免分离,上样时避免枪头插得太深。 9. 泳道中心凹陷: • 原因:梳子插入后胶暴露于空气中时间过长。 • 解决方案:尽量在 25 分钟内插入梳子,避免长时间暴露。 结语 通过详细了解SDS-PAGE凝...
4、制备分离胶(下层胶) 按照配方表依次加入相应体积的试剂(1.0mm玻璃板一块胶总体积5.0ml,1.5mm玻璃板一块胶总体积7.5ml足矣),加完SDS后加APS前可以先混匀,然后迅速加入APS和TEMED,马上混匀(手摇或者振荡器摇匀),灌胶,注意胶的高度,要留有足够的空间给压缩胶,一般压缩胶的深度要求是梳子下缘再往下1厘米左右。
8. 上层胶中电泳出现“漏样”: • 原因:玻璃板与胶局部分离,上样缓冲液问题。 • 解决方案:小心取下玻璃板,避免分离,上样时避免枪头插得太深。 9. 泳道中心凹陷: • 原因:梳子插入后胶暴露于空气中时间过长。 • 解决方案:尽量在 25 分钟内插入梳子,避免长时间暴露。 结语 通过详细了解SDS-PAGE凝...
碧云天生产的SDS-PAGE凝胶配制试剂盒提供了配制SDS-PAGE凝胶所需的各种试剂,用户只需自备制胶器具和蒸馏水,即可配制PAGE胶(即聚丙烯酰胺凝胶)。 SDS-PAGE凝胶配制试剂盒不仅可用于配制SDS-PAGE凝胶,也可用于配制非变性(native)PAGE凝胶。 本试剂盒约可配制30-50块常规大小的PAGE胶。
P069515% SDS-PAGE凝胶超快速配制试剂盒可制30-50块胶196.00元 碧云天生产的15% SDS-PAGE凝胶超快速配制试剂盒(15% SDS-PAGE Gel SuperQuick Preparation Kit)提供了简单而又超快速地配制15% SDS-PAGE凝胶(即SDS聚丙烯酰胺凝胶)所需的所有试剂,用户只需自备制胶器具和蒸馏水,即可配制15% SDS-PAGE凝胶。
SDS-PAGE凝胶配方及制胶 12%分离胶 体积 试剂 5ml 8ml 10ml 15ml 25ml 30ml 60ml 90ml 120ml 30%Acr-Bis(ml)2 3.2 4 6 10 12 24 36 48 1.5M Tris-HCl PH8.8(ml)1.25 2 2.5 3.75 6.25 7.5 15 22.5 30 ddH2O(ml)1.65 2.64 3.3 4.95 8.25 9.9 19.8 29.7 39.6 ...
而在配胶时浓缩胶只加前三个组分,混合液要于4℃冰箱保存,待分离胶凝固后再取出加入AP和TEMED溶液,枪头搅拌均匀,灌胶后插入梳子,然后于37℃凝固15-30 min。凝固的胶连带其附着的玻璃板用塑料薄膜严密包裹可在4℃冰箱保存2-4天,长时间保存易干胶,要重新做胶。
2.APS配制成10%溶液后,应分装保存在-20°C。将配置成的10%的APS溶液存放在4°C时易发生失效,保存时间较短,应尽量减少室温存放时间,以防失效。 3.TEMED易挥发,使用后请盖紧瓶盖并4°C保存。另外凝胶凝聚的速度与温度及光照关系密切,可通过适当调节TEMED 的用量,控制在不同的室内环境下凝胶凝聚的速度,配置胶时...
SDS-PAGE凝胶制备属于实验室最常规的操作了,刚开始做蛋白实验总是在找凝胶配制实验中所用试剂的配方,这里总结了分离胶、浓缩胶、分离胶和浓缩胶缓冲液、考马斯亮蓝染液、样品缓冲液、电泳缓冲液等配方。 1. 分离胶(12%) 配制 所需试剂 所需体积 分离胶(12%) ...