0.01 MNaOAc (pH5.2) 参照此配方配制。5×Tris-Glycine Buffer(SDS-PAGE电泳缓冲液)组分浓度:0.125 M Tris, 1.25 M Glycine, 0.5%(W/V) SDS 1.称量下列试剂置于烧杯中。2.加入约900 ml去离子水搅拌溶解。3.定容至1L,室温保存。(参照《分子克隆》二版P884)T
5×Tris-Glycine电泳缓冲液的配制:(1 L)1. 称取Tris粉末15.1 g、Glycine(甘氨酸)94 g、SDS 5.0 g;2. 加入约800 ml的去离子水,搅拌溶解;3. 加去离子水定容至1 L,室温保存。注意:加水时应让水延着壁缓缓流下,以避免由于SDS的原因产生很多泡沫。5×SDS-PAGE Loading Buffer的配制(方案一):...
SDS-PAGE电泳相关溶液的配置电泳相关溶液的配置: 1、30%丙稀酰胺混合溶液(100ml):称取29g丙稀酰胺和1gbis丙稀酰胺,用水溶解定容到100ml,过滤,4摄氏度保存一个月。 2、5×SDS电极缓冲液:称取Tris base15.1g,甘氨酸94.g,SDS 5.g加dH2O定容至1000ml。 3、2×样品缓冲液(10ml):甘油2ml,溴酚蓝0.0202g,1M...
除了上述提到的组份外,还需要添加以下成分以完成5×SDS-PAGE Loading Buffer的配制:50%(V/V)甘油5%(W/V)β-巯基乙醇 配制总量为5毫升。请确保在配制过程中遵循实验室安全规范,并按照标准操作程序进行。使用移液管准确量取1M Tris-HCl 1.25毫升,并加入到10毫升的塑料离心管中。接着,称取SDS 0.5克...
4)电泳缓冲液(5000 mL):15.1 g Tris-Base,94 g Glycine,50 mL 10% SDS溶液,去离子水(dH2O)溶解、定容至5 L; 5)5×湿转缓冲液(1000 mL):29.1 g Tris-Base,94 g Glycine,去离子水(dH2O)溶解、定容至1 L; 6)1×湿转缓冲液(1000 mL):200 mL 5×湿转缓冲液,200 mL甲醇,600 mL去离子水(dH2O...
5×SDS-PAGE Loading Buffer的配制方法(10 ml)依据《蛋白质技术手册》汪家政、范明的记载如下:所需组分包括:60 mM Tris-HCl pH6.8;2% SDS;0.1%溴酚兰;25%甘油;14.4 mM β-巯基乙醇。具体配制步骤如下:1. 准备1M Tris-HCl pH6.8 0.6 ml;50%甘油5 ml;10% SDS溶液2 ml;1%...
SDS-PAGE(聚丙烯酰胺凝胶电泳)是一种常用的蛋白质分离技术,可以将蛋白质按照其分子量大小分离出来。在这个过程中,需要使用一系列试剂来形成凝胶、还原并变性蛋白质样品、以及进行电泳。下面我们将介绍SDS-PAGE电泳试剂的配制方法。将蒸馏水取2L,通过0.22μm的滤膜过滤3遍来除杂质,备用。将40%(w/v)丙烯酰胺...
SDS-PAGE电泳溶液的配置 1、5×Tris-甘氨酸电泳缓冲液 试剂 浓度 称重 备注 Tris 0.125 M 15.1g 加入800 ml的双蒸水溶解, 定容至1 L,室温保存 甘氨酸(Glycine) 1.25 M 94g SDS 0.5%(W/V) 5g 2、染色液 试剂 浓度 称重 备注 乙醇 25%(V/V) 250 mL 双蒸水溶解,定容至1 L,滤纸过滤后,室温保存 ...
在进行Tricine-SDS-PAGE电泳实验时,阳极缓冲液与阴极缓冲液的配置是关键步骤之一。阳极缓冲液的配置方法是:首先将121.14克Tris溶解在400毫升的蒸馏水中,然后使用1.0摩尔/升的盐酸(HCl)将溶液pH值调整至8.9,最后将总体积定容至500毫升。阴极缓冲液的配置则涉及更复杂的成分:将60.55克Tris、89....
(2)100 g/L SDS 溶液:10 g SDS (要求高纯度,其质量明显影响电泳效果)加100 mL双蒸水,于洁净的250 mL烧杯中进行微波加热溶解,注意不要爆沸,间歇用玻璃棒搅拌以加速溶解,完全溶解后的溶液应清澈透明无色。倒入无色玻璃试剂瓶中,4℃冰箱保存。...