一、切割凝胶 切割凝胶是从SDS-PAGE凝胶中回收蛋白质的最常用方法之一。首先,使用刀片或类似工具将含有目标蛋白质的凝胶条带切割下来。然后,将切割下来的凝胶条带放入离心管中,加入适量的缓冲液(如PBS),在室温下孵育一段时间,使蛋白质从凝胶中释放出来。 二、破碎凝胶 破碎凝胶是另一种从SDS-PAGE凝胶中回收蛋白质...
SDS-PAGE回收蛋白的方法: 1.先要大量上样,配好分离和浓缩胶后不要插梳子,其他电泳条件同。 2.跑完胶后,将胶放入缓冲液中冲洗,KCl染色液染色后,可以看到一条明显的白色条带,就是你的目的蛋白(无目的蛋白的空白呈透明状),切下谜底带,将其用碾磨棒碾碎,在其中适当(尽量少加,不要超过500 ul/块胶)加入PBS或...
SDS-PAGE中蛋白质回收方法 下载积分: 2990 内容提示: 尝生命 的化 学》99 1 5年1 5卷3期SD S一P A G E中 蛋白质回收方 法傅 国平(南 京经 济学院食品科学 与工 程系,南京2 10 00 3 )关键 词蛋 白质回收s D s一 PA G E 作 为一 种常规的蛋白 质分 离及 分析手段, 具有简 便、迅速 ...
我的方法是：先跑SDS-PAGE，然后用预冷的0.25M KCl染色（预先放在4度冰箱中），目的条带会出现白色...
材料与方法 1. 样品制备:收集不同来源的蛋白质样品,如动植物组织、细胞培养液等。 2. 样品处理:将样品加入SDS-PAGE样品缓冲液,并在100℃下煮沸5分钟,使蛋白质变性。 3. 准备SDS-PAGE凝胶:按照实验要求制备SDS-PAGE凝胶。 4. 样品加载:将处理好的样品加载到SDS-PAGE凝胶孔中。 5. 电泳分离:在设定好的电泳...
SDS-PAGE中蛋白质回收方法 来自知网 作者 傅国平 摘要 SDS-PAGE中蛋白质回收方法傅国平(南京经济学院食品科学与工程系,南京210003)关键词蛋白质回收SDS-PAGE作为一种常规的蛋白质分离及分析手段,具有简便,迅速的优点,但从凝胶中回收所需蛋白质往往比较困难,主要是由于经考马...
我想把考马斯亮蓝染色SDS-PAGE上的目的蛋白部分胶切下来去打质谱，鉴定分子量，请问如何操作？用什么...
SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)法测定蛋白质的分子量具有简便、快速、重复性好的优点,是目前一般实验室常用的测定蛋白质分子量的方法。三、试剂及主要器材1.主要试剂1)标准蛋白混合液内含:磷酸化酶(Mw 94,000),牛血清蛋白(Mw 67,000),肌动蛋白(Mw 43,000),磷酸酐酶(Mw 30,000)和溶菌酶(Mw 14,000)2...
我要做一个膜蛋白的抗体，通过超速离心得到一些蛋白，然后进行SDS-PAGE电泳找到想要的蛋白，然后切胶。
答案:首先,将蛋白质样品与含有SDS和还原剂的样品缓冲液混合,然后在电泳槽中加入分离胶和浓缩胶。将样品加载到浓缩胶上,接通电源,使蛋白质在电场的作用下迁移。由于SDS的存在,所有蛋白质都会带有负电荷,因此它们会向正极移动。蛋白质的迁移速度取决于其分子量的大小,分子量越小的蛋白质迁移得越快。电泳完成后,可以...