在进行SDS-PAGE电泳时,使用合适的上样缓冲液至关重要。以下是一个简单而有效的5xSDS-PAGE Loading Buffer的配方,帮助你更好地分离和可视化蛋白质。📏 配方组分: 250mM Tris-HCl(pH 6.8) 10%(W/V) SDS 0.5%(W/V) BPB 50%(V/V) 甘油 5%(W/V) β-巯基乙醇🔬 配制步骤: 将1.25mL 1M Tris-HCl、...
SDS-PAGE Loading buffer5×SDS-PAGE Loading Buffer配制方法 组份浓度: 250mMTris-HCl(pH6.8) 10%(W/V)SDS 0.5%(W/V)BPB(溴酚兰) 50%(V/V)甘油 5%(W/V)β-巯基乙醇 配制量:5mL 配制方法: 1.量取下列试剂,置于10mL塑料离心管中。 1MTris-HCl1.25mL SDS0.5g BPB25mg 甘油2.5mL 2.加入去离子...
另:Takara公司Catalog-N5上的5×SDS-PAGE Loading Buffer配方:组分浓度:配制量5 ml 配制方法 1.称量下列试剂置于10ml塑料离心管中。2.加去离子水溶解后定容至5 ml。3.小份(500 ul/份)分装后于室温保存。4.使用前将25 ul的2-ME加到每小份中。5.加入2-ME的Loading Buffer可在室温下保存一个月左右...
5×SDS-PAGE Loading Buffer的配制方法(10 ml)依据《蛋白质技术手册》汪家政、范明的记载如下:所需组分包括:60 mM Tris-HCl pH6.8;2% SDS;0.1%溴酚兰;25%甘油;14.4 mM β-巯基乙醇。具体配制步骤如下:1. 准备1M Tris-HCl pH6.8 0.6 ml;50%甘油5 ml;10% SDS溶液2 ml;1%...
SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(SDS-PAGE Sample Loading Buffer, 5X),是一种经过改良的以溴酚蓝为染料,5倍浓缩的蛋白上样缓冲液。可以直接用于细胞或组织样品的裂解,并用于后续常规的SDS-PAGE蛋白样品的上样。使用该产品直接裂解蛋白样品的优点是比较便捷;缺点是裂解好的蛋白样品不能用常规的蛋白定量方法测定蛋白浓度。这...
5×SDS-PAGE Loading Buffer的配制(方案一):(5 ml) (本方案摘自Takara网站) 组分:Tris-HCl? pH6.8(250 mM);SDS (10%);溴酚兰(0.5%);甘油(50%);β-巯基乙醇(5%) 配制过程: 1. 量取1M Tris-HCl (pH6.8) 1.25 ml;甘油2.5 ml;称取SDS固体粉末0.5 g;溴酚兰25 mg; ...
5×SDS-PAGE Loading Buffer用于蛋白质电泳上样,其配制方法如下:首先,准备1M Tris-HCl(pH6.8)0.6毫升,50%甘油5毫升,10%SDS溶液2毫升,1%溴酚兰1毫升。然后,加入去离子水至总体积10毫升。配置完成后,可以将此溶液分装保存。在4℃条件下,该缓冲液可以保存数周;若置于-20℃,则可保存数...
-配方为: 30g Tris base (pH 6.8) 144g glycine 1gSDS 将固体溶解于1L蒸馏水中,并调整pH至6.8 四、样品处理缓冲液配方: 1. 样品加载缓冲液(sample loading buffer) -用于处理蛋白样品,以便在凝胶上获得良好的分离效果。 -配方为: 0.5M Tris-HCl(pH 6.8) 20%(v/v)甘油 10%(w/v)SDS 0.05%(w/v)溴...
SDS样品缓冲液(Loading buffer): 通常含有SDS、甘油、溴酚蓝、DTT或β-巯基乙醇(还原剂)等成分。 Marker(蛋白分子量标准) 电泳装置 电泳仪与电源 考马斯亮蓝染色液(或其他染色液) 实验步骤 一、制备SDS-PAGE凝胶 准备分离胶和浓缩胶 按照不同的蛋白质大小,选择合适的分离胶浓度(常见为10-15%)。具体配方如下:...