Ohsawa 等报道了一种改进的银染方法,可检测小至 10-15g ( femtograms, 飞克)的蛋白。由于银染的灵敏度高,各大公司均生产银染试剂盒。 银染的机制是将蛋白带上的硝酸银(银离子)还原成金属银,以使银颗粒沉积在蛋白带上。用银染蛋白的吸光度对它们的浓度作图呈现不同...
测定蛋白质分子量的方法有很多,SDS-PAGE是主要方法之一,也是实验室使用最普遍的一种。在SDS-PAGE中,已知分子量的标准蛋白质和未知样品同时电泳。染色后,根据标准蛋白质的相对迁移率和分子量的对数,可得到一条标准曲线,利用未知样品的相对迁移率可在标准曲线上求得其分子量。另外,SDS-PAGE法可分为还原电泳和非还原...
银染染色试剂及步骤 步骤 试剂 时间 备注 固定液 50%乙醇+12%醋酸+0.1%甲醛+38%H2O 20 min 漂洗液 50%乙醇 3 min 引发液 0.02%Na2S2O3 1 min 清洗 H2O 3次/min 染色 0.5%AgNO3+0.075%甲醛 2~5 min 清洗 H2O 3次/min 显色 2.5%Na2CO3+0.05%甲醛 至显色 终止 1%乙酸 注:染色液的配制方法,40 mL...
SDS-PAGE 银染步骤1. 电泳完成后,用超纯水洗胶2次,每次洗涤5分钟。 2. 固定:将凝胶浸泡在 25 ml 的固定液中,固定液充分覆盖胶。放于摇床上室温摇动 15 分钟。更换固定液,重复一次。固定液的配制:超纯水:乙醇:冰醋酸=6:3:1. 3. 固定完成后,配制 10%乙醇,洗胶 2 次,每次洗涤 5 分钟。 4. 再用超...
1、实验介绍 在聚丙烯酰胺凝胶系统中,加入一定量的十二烷基硫酸钠( SDS),使蛋白样品与SDS结合形成带负电荷的复合物,由于复合物分子量的不同,在电泳中反应出不同的迁移率。根据标准样品在该系统电泳中所作出…
Genie G 生产的 EDI 纯水水质完全满足银染实验,还可以用来配制其他相关实验的试剂;超纯水可以应用于银染实验的上下游以及其他蛋白质研究实验,例如蛋白SDS-PAGE电泳、Western Blotting等。取水终端安装的RephiBio滤器,可以制备无热原(内毒素)、核酸酶、细菌的超纯水,用于生化分析和分子生物学。Genie G一机两水,高度...
SDS-PAGE电泳操作流程—含考染银染碘染.docx,1 SDS- 操作流程——考染 1、预备溶液 30% 30%聚丙烯酰胺溶液 30%〔w/v〕Acrylamide 【组分浓度】 各种组分名称 各种组分名称 30%Acr-Bis(29:1) 29%Acrylamide( 丙烯酰胺) 1%BIS(N,N’-亚甲丙烯酰 胺) 配制不同体积所需各成分的
江苏农学院学报第16卷。实验室技术。蛋白质分析中SDS一PAGE银染法与考马斯亮蓝染色法敏感性的比较高裕刘秀梵张如宽江苏农学院动物医学系扬州5009sDs一PAGE技术是蛋白质分析最常用的手段之一。SDS一PAGE分离后的条带通常采用考马斯亮蓝进行染色。80年代产生了一种更为敏感的
1. 银染主要出现在胶的表面,用薄胶(0.5-0.75mm)可以提高灵敏度。 2. 对于考马斯亮蓝染色的胶,可用甲醇将胶漂洗后,继续进行银染。乙酸会干扰银染,因此要确保将凝胶中的乙酸彻底洗净。如果凝胶被过度银染,可用Rapid Fix脱色,并用考马斯亮蓝二次染色。
银染 试剂: 1、1%乙酸 2、显影液:2.5%的碳酸钠和0.02%甲醛的水溶液,新鲜配置 3、30%乙醇 4、固定液:Ethanoh:glacial acetic acid:H2O(30:10:60) 5、硝酸银溶液:现配现用,将20%AgNO3稀释成0.1% 步骤: 1、将凝胶泡在至少5倍体积的固定液中,室温下4-12h 2、去掉固定液,将胶泡在至少5倍体积的30%乙醇...